益气补肾实验方对自然流产模型小鼠foxp3、STAT5、NF-κB mRNA表达的影响

发布时间：2017-07-17 07:24

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【摘要】：目的观察益气补肾实验方对自然流产模型小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞中foxp3mRNA表达及蜕膜组织foxp3、STAT 5、NF-κB mRNA表达的影响。方法将雌性CBA/J与雄性DBA/2或雄性BALB/c小鼠以2∶1合笼交配,制备自然流产模型。将CBA/J孕鼠分为5组:阴性对照组、阳性对照组、中药高剂量治疗组、中药中剂量治疗组、中药低剂量治疗组,每组10只;阴性对照组于妊娠第0天至处死日每天以10mg/kg的剂量灌服生理盐水1次;阳性对照组于妊娠第4天以10mg/kg的剂量单次灌服环孢素A溶液;中药高、中、低剂量治疗组于妊娠第0天至处死日每日分别按48、24、12g/kg的剂量灌服益气补肾实验方1次。将孕鼠于妊娠第9、14天处死,取新鲜脾脏用于提取Treg细胞,并取孕鼠蜕膜组织-80℃冻存。采用磁珠分选的方法分离和纯化脾脏CD4+CD25+细胞,采用流式细胞术鉴定分选前后CD4+CD25+的纯度,运用RT-PCR分析CD4+CD25+细胞中foxp3mRNA的表达情况;运用RT-PCR分析蜕膜组织中foxp3、STAT 5A、STAT 5B、NF-κB mRNA的表达情况。结果 CD4+CD25+Treg的纯度可达到88%以上,经台盼蓝检测其活性大于95%。纯化分离前CD4+CD25+/CD4+平均为13.20%;纯化分离后CD4+CD25+/CD4+平均为91.43%。与阴性对照组比较,阳性对照组、中药高剂量治疗组Treg细胞中foxp3mRNA表达水平明显升高(P0.05);中药高剂量治疗组较中、低剂量组小鼠脾脏Treg中foxp3mRNA表达升高(P0.05)。与阴性对照组比较,阳性对照组、中药高、中剂量组9、14天蜕膜组织foxp3、STAT 5BmRNA表达升高(P0.05);阳性对照组、中药高剂量组9、14天及中药中剂量组蜕膜组织STAT 5A mRNA表达升高(P0.05,P0.01);阳性对照组及中药各剂量组蜕膜组织NF-κB mRNA表达降低(P0.01)。结论益气补肾实验方可上调自然流产模型小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞foxp3mRNA及蜕膜组织中foxp3、STAT 5mRNA表达,下调母胎界面组织中NF-κB mRNA的表达,促进妊娠免疫耐受状态的维持。
【作者单位】： 浙江省立同德医院生殖免疫科;阿尔伯塔大学数学与统计科学学部;浙江中医药大学第一临床医学院;浙江省中医院妇科;
【关键词】： 自然流产模型 转录因子foxp 转录信号转导子与激活子 核转录因子-κB 益气补肾实验方
【基金】：浙江省中医药重点研究计划项目(No.2012ZZ004)
【分类号】：R285.5;R-332
【正文快照】： 自然流产(spontaneous　abortion)是指未使用人小鼠孕中晚期母胎界面CD4+CD25+T细胞的表达,工方法,在妊娠28周前,胚胎或胎儿体重不足提示益气补肾中药有助于妊娠时免疫耐受状态的维1　000g而终止者,其发病率占生育年龄妇女的持[7]。为进一步探讨益气补肾中药在防治免疫性自0.4

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本文编号：552522