Vero细胞无血清培养基的筛选及其培养流感病毒H5N1条件的优化

发布时间：2017-07-25 19:33

  本文关键词：Vero细胞无血清培养基的筛选及其培养流感病毒H5N1条件的优化

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【摘要】：目的筛选适宜Vero细胞培养的无血清培养基,并优化其培养流感病毒H5N1的条件。方法取VP-SFM培养的Vero细胞(SFM-Vero),以增殖速率为指标,筛选无血清培养基[VP-SFM、EX-CELL~(TM) VERO、Virus Pro ~(TM) VERO、自制无血清培养基1(SFM-1)和2(SFM-2)];采用中心组合实验(Box-Behnken)优化SFM-Vero培养流感病毒H5N1的pH、TPCK-Trypsin浓度和病毒接种MOI。结果 Vero细胞在VP-SFM和自制SFM-1培养基中生长情况好于其他无血清培养基;H5N1病毒株能够感染无血清适应的Vero细胞;SFM-Vero培养流感病毒H5N1较优条件为:p H 7.64,TPCK-Trypsin浓度0.68μg/ml,MOI 0.01。在该条件下培养的流感病毒HA滴度可达768 HAU/50μl,为正常培养基培养的Vero细胞的2.33倍。结论筛选出适宜Vero细胞生长的无血清培养基,优化了流感病毒H5N1 Vero细胞适应株无血清培养的条件。
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所;南开大学生命科学学院;
【关键词】： 无血清培养基 流感病毒Vero细胞适应株 HN
【基金】：细胞流感减毒活疫苗合作研究(国际科技合作项目,2011DFR30420) 腮腺炎减毒活疫苗等病毒性疫苗关键技术及产品研发(2012AA02A404) Vero细胞流感减毒活疫苗研制(2013ZX10004003003002) 疫苗研发与新技术应用省创新团队(2015HC027)
【分类号】：R373.13
【正文快照】： 流感病毒为单股负链RNA病毒,变异快[1],是威胁人类健康的主要病原体之一。目前,接种流感疫苗是预防和控制流感大流行的最直接且行之有效的手段[2-3]。鉴于使用鸡胚生产流感疫苗存在较多不足之处[4],因此,WHO推荐使用Vero细胞作为流感疫苗的生产介质[5-6]。Vero细胞是日本学者M

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本文编号：572942