清热止血颗粒、雷公藤多苷对紫癜性肾炎足细胞损伤模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白表达的影

发布时间：2017-07-26 01:10

  本文关键词：清热止血颗粒、雷公藤多苷对紫癜性肾炎足细胞损伤模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白表达的影响

  更多相关文章： 紫癜性肾炎 中成药 Nephrin Podocin Podocalyxin

【摘要】：目的:通过观察清热止血颗粒、雷公藤多苷(GTW)等药物对紫癜性肾炎(HSPN)肾小球足细胞损伤模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白表达的影响,探讨各药物对紫癜性肾炎治疗作用的机制。方法:体外培养小鼠系膜细胞、小鼠足细胞,分离提纯紫癜性肾炎患儿血清中的单体Ig A1(m Ig A1),热聚合成热聚合Ig A1(aggregated Ig A1,a Ig A1),用a Ig A1与小鼠系膜细胞共培养48小时(h)后留取培养液,再用其刺激肾小球足细胞,制造足细胞损伤模型,同时分别加入清热止血颗粒、中药制剂雷公藤多苷、以上两种药物联合用药、强的松联合低分子肝素、空白含药血清及胎牛血清,分别于刺激24h和48h后收集足细胞,分别通过Western Blot(WB)及免疫荧光(Immunofluorescence,IF)两种方法测定足细胞相关蛋白表达量的变化。结果:一、分别干预24h、48h后,通过WB方法检测足细胞Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白的表达量,结果显示三个蛋白均为正常组最高,模型组最低,差异有显著统计学意义:(1)24h后足细胞Nephrin蛋白的表达:GTW组、GTW+清热止血颗粒组及强的松+低分子肝素组的Nephrin蛋白表达较模型组明显升高,差异有显著统计学意义,清热止血颗粒组与模型组之间无统计学差异,GTW+清热止血颗粒组、GTW组及强的松+低分子肝素组三组之间互相对比无统计学意义;48h后雷公藤多苷+清热止血颗粒组较强的松+低分子肝素组蛋白量显著升高,差异有显著统计学意义。(2)24h后足细胞Podocin蛋白的表达:GTW+清热止血颗粒、强的松+低分子肝素组的蛋白量与模型组对比显著升高,差异有显著统计学意义,GTW组蛋白表达量较模型组增高,强的松+低分子肝素组较GTW组的表达显著升高,但与GTW+清热止血颗粒组相比差异无统计学意义,清热止血颗粒组蛋白表达量与模型组无差异;48h后结果:强的松+低分子肝素组较GTW组蛋白表达增高明显,但相对于GTW+清热止血方组无统计学差异。(3)24h后足细胞Podocalyxin蛋白的表达:GTW+清热止血颗粒组蛋白表达较模型组增高,差异有统计学意义,GTW组、强的松+低分子肝素组蛋白表达较模型组增高明显,差异有显著统计学意义,清热止血颗粒组蛋白表达较模型组差异无统计学意义,强的松+低分子肝素组蛋白表达较GTW+清热止血颗粒组增高,差异有统计学意义;48h后Podocalyxin蛋白的表达结果显示:GTW组、GTW+清热止血颗粒组、强的松+低分子肝素组蛋白表达较模型组增高明显,差异有显著统计学意义,三组组间比较差异无统计学意义。二、IF测定足细胞标志蛋白Nephrin、Podocin、Podocalyxin的定位表达显示:正常对照组Nephrin蛋白在足细胞胞浆表达,Podocin蛋白在足细胞胞膜表达,Podocalyxin蛋白在足细胞胞浆内呈颗粒状表达;模型组Nephrin蛋白的表达明显减弱、Podocin蛋白和Podocalyxin蛋白无表达;各组药物均能上调足细胞损伤模型上这三种蛋白的表达量。刺激48h与24h相比,细胞数量急剧下降,细胞形态不完整,部分细胞呈破絮状。结论:1、GTW、GTW+清热止血颗粒、强的松+低分子肝素均有修护损伤足细胞的作用。2、GTW+清热止血颗粒对于足细胞结构蛋白Nephrin的修护作用可能比强的松+低分子肝素的效果好;强的松+低分子肝素在保护Podocin蛋白方面可能优于单用GTW,GTW+清热止血颗粒可起到协同作用。强的松+低分子肝素在保护Podocalyxin蛋白方面较GTW、GTW+清热止血颗粒起效快,但是随着时间推移三者疗效无差异。
【关键词】：紫癜性肾炎 中成药 Nephrin Podocin Podocalyxin
【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R272;R-332
【目录】：

• 缩略语表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 材料和方法13-24
• 1 实验材料13-14
• 2 实验方法14-24
• 实验结果24-33
• 1 Western Blot法检测各组含药血清对足细胞损伤模型Nephrin蛋白表达量的影响24-26
• 2 Western Blot法检测各组含药血清对足细胞损伤模型Podocin蛋白表达量的影响26-28
• 3 Western Blot法检测各组含药血清对足细胞损伤模型Podocalyxin蛋白表达量的影响28-30
• 4 免疫荧光法测定各组含药血清对足细胞损伤模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin蛋白定位表达的影响30-33
• 讨论33-38
• 一 中药对HSPN的研究33-36
• 二 HSPN模型探讨36-38
• 结论38-39
• 致谢39-40
• 参考文献40-43
• 附录43-51
• 附录1 综述及文献43-51
• 参考文献47-51
• 附录2 科研情况及科研论文51

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 杜学峰;;简单美味的水果药膳[J];养生大世界;2010年11期

2 张行;;清热止血治疗支扩咯血31例疗效观察[J];黑龙江中医药;1989年01期

3 赵莉;卢燕;马宝璋;;清热止血宁对未成年大鼠性腺轴调节功能的影响[J];上海中医药大学学报;2008年03期

4 王艳春;;清热止血法治疗崩漏45例临床观察[J];辽宁中医杂志;1983年11期

5 李慧;刘瑞芬;;祛瘀清热止血调经法治疗宫内节育器出血副反应[J];山西中医;2013年02期

6 杨永芳;50例急、慢性肾炎用清热止血法治疗[J];上海中医药杂志;1993年11期

7 邢磊;钟慈声;;清热止血药治疗乳糜尿前后足背皮肤电镜观察及其发病与治疗机理探讨[J];中国中西医结合杂志;1992年12期

8 邢聪，邢涛，邢雪梅，邢磊;清热止血药治疗乳糜尿淋巴管内压力观察[J];中国中西医结合外科杂志;1996年04期

9 邢聪，邢雪梅，，邢磊;清热止血药对乳糜尿患者免疫功能的观察[J];中国中西医结合杂志;1994年10期

10 包书伟;止血益精汤[J];广西中医药;1997年05期

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 第四军医大学西京医院博士 孟华;清热止血药膳三款[N];医药养生保健报;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 赵莉;清热止血宁治疗血热型崩漏、月经过多的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 尚东方;清热止血颗粒、雷公藤多苷对紫癜性肾炎足细胞损伤模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白表达的影响[D];河南中医药大学;2016年

本文编号：574094