非必需氨基酸和β-巯基乙醇对神经干细胞增殖的影响
发布时间:2017-08-06 03:18
本文关键词:非必需氨基酸和β-巯基乙醇对神经干细胞增殖的影响
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【摘要】:目的观察非必需氨基酸(NEAA)和β-巯基乙醇对神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法取孕龄为14.5 d的雌鼠,处死后提取NSCs并培养,取5~7代的NSCs用于实验,将NSCs细胞使用传代培养基培养,并分为四组,对照组:加入磷酸盐缓冲液(PBS)12μL;NEAA组:加入NEAA 10μL,PBS 2μL;β-巯基乙醇组:加入β-巯基乙醇2μL,PBS 10μL;NEAA+β-巯基乙醇组:加入NEAA 10μL,β-巯基乙醇2μL。通过细胞计数法计算NSCs的增殖速度,噻唑蓝(MTT)法测定NSCs增殖率,RT-PCR法测定NSCs中凋亡相关基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的表达,免疫组化法对NSCs进行鉴定并测定NSCs向神经元和星形胶质细胞的分化潜能。结果与对照组比较,NEAA组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA降低(P0.05或0.01);β-巯基乙醇组及NEAA+β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA、TUJ-1阳性细胞百分比、GFAP阳性细胞百分比降低,Nestin升高(P0.05或0.01)。与NEAA组比较,NEAA+β-巯基乙醇组各项指标差异均有统计学意义(P0.05或0.01);与β-巯基乙醇组比较,NEAA+β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3mRNA降低(P0.05或0.01)。结论 NEAA和β-巯基乙醇均能促进NSCs增殖,联合使用起协同作用。
【作者单位】: 昆明医科大学第二附属医院;昆明医科大学附属精神卫生中心;昆明医科大学;
【关键词】: 神经干细胞 非必需氨基酸 β-巯基乙醇 增殖 分化
【基金】:国家自然科学基金资助项目(31460314)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 附属精神卫生中心;3昆明医科大学)神经干细胞(NSCs)广泛存在于胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统,是一类具有分裂潜能和自我更新能力的前体细胞,它可以通过对称分裂和不对称分裂方式进行自我更新并产生神经组织的各类细胞,包括神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等[1]。NSCs的
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,本文编号:628159
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