miR-1247-5p对Smad2基因的靶向调控作用

发布时间：2017-09-04 05:26

  本文关键词：miR-1247-5p对Smad2基因的靶向调控作用

  更多相关文章： miR--p TGF-β信号通路 Smad基因 肿瘤

【摘要】：目的利用miR-1247-5p过表达模拟物mimics,研究miR-1247-5p对TGF-β信号通路中关键蛋白Smad2的靶向调控作用。方法合成模拟miR-1247-5p过表达的模拟物mimics,及抑制miR-1247-5p表达的抑制物inhibitors;同时构建与miR-1247-5p互补靶基因Smad2的3'非翻译区,将其克隆到线性化的Report荧光报告载体中。将测序鉴定阳性的report-Smad2 3'-UTR重组质粒,与miR-1247-5p的mimics/inhibitors共转染至HEK-293T细胞,通过relative luciferase activity实验验证靶向关系,并通过Western blot实验进一步检测Smad2蛋白表达水平。结果成功构建report-Smad2 3'-UTR重组质粒,Western blot实验表明转染miR-1247-5p mimics组中Smad2蛋白表达下调(P0.05);而转染miR-1247-5p inhibitors组中,Smad2蛋白表达上调(P0.05)。结论证实miR-1247-5p直接靶向TGF-β信号通路中关键蛋白Smad2的表达,在蛋白水平对其进行调控,为进一步研究miRNA在细胞通路中的调控作用提供了依据。
【作者单位】： 宁夏医科大学检验学院;西安市中心血站;宁夏医科大学总医院;
【关键词】： miR--p TGF-β信号通路 Smad基因 肿瘤
【基金】：国家自然科学基金(81460368) 宁夏科技支撑项目[宁科计字(2013)20号] 宁夏自然科学基金(NZ-13149)
【分类号】：R363
【正文快照】： microRNA(miRNA)是一类存在于真核生物,长度为18~25 nt的内源性小分子RNA,通过与靶基因mRNA 3'端特定序列结合,从而降解目标mRNA或对其进行转录抑制[1]。近年来研究发现,miRNA可分布在肥大细胞、DC和巨噬细胞的分泌物中,参与细胞间多个信号传导[2]。miRNA通过靶向作用于数个基

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 梁佳玉;王玉美;方佳;杨雁;;转化生长因子-β_1对大鼠肌成纤维细胞增殖及胞内Smad蛋白磷酸化的影响[J];安徽医科大学学报;2006年05期

2 Giuliana Zanninelli;Antonella Vetuschi;Roberta Sferra;Angela D'Angelo;Amato Fratticci;Maria Adelaide Continenza;Maria Chiaramonte;Eugenio Gaudio;Renzo Caprilli;Giovanni Latella;;Smad3 knock-out mice as a useful model to study intestinal fibrogenesis[J];World Journal of Gastroenterology;2006年08期

3 卫晓红;祁丽花;徐健;迟晓春;董静霞;;卵泡刺激素调节大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的表达及磷酸化[J];解剖学杂志;2008年02期

4 苏丽婷;夏时海;;Smad蛋白在转化生长因子-β信号转导通路中的作用与机制[J];医学分子生物学杂志;2008年04期

5 曾惠芬;王庆文;;转化生长因子-β及其Smad信号转导的研究进展[J];中国药物与临床;2010年10期

6 刘瑛;林丁;;条件性Smad4基因敲除鼠模型的建立和鉴定及初步表型[J];国际眼科杂志;2014年01期

7 陈琛;叶冬梅;邵淑娟;;转化生长因子-β/Smad信号通路研究进展[J];医学分子生物学杂志;2006年02期

8 林在俊;肖建如;罗剑;黄权;周振华;陈素;杨兴海;吴志鹏;;大鼠Smad6慢病毒干扰载体的构建与鉴定[J];国际骨科学杂志;2011年06期

9 吴建新,孟祥军,陈源文,程计林,李定国,陆汉明;Smad 7与转化生长因子β_1受体后信息调控[J];中华肝脏病杂志;2003年05期

10 兰雨;谭晓红;翁土军;刘兵;杨晓;;剔除成骨细胞特异性基因Smad4不影响小鼠造血稳态的维持[J];中国实验血液学杂志;2008年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 Bensoussan D.;Stoltz J.F.;de Isla N;;Differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells induced by biaxial tension involves Smad3 activation[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年

2 ;Essential Role of Smad4 in Maintaining Cardiomyocyte Proliferation during Murine Embryonic Heart Development[A];中国遗传学会“发育、遗传和疾病”研讨会论文汇编集[C];2007年

3 Kai Zhao;Haojun Xiong;Shan Chen;Fengtian He;;LXR suppresses Smad3 and plays anti-fibrotic role in renal cells[A];中国生物化学与分子生物学会第十一次会员代表大会暨2014年全国学术会议论文集——专题报告五[C];2014年

4 胡静;张远强;刘新平;许若军;;Smad4蛋白在生后不同龄大鼠睾丸的表达与发育变化研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

5 张东山;刘伏友;陈香美;彭佑铭;;抑制Smad3的pSUPERRNAi系统的构建和活性鉴定[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

6 崔玉芳;姜竺君;毛春明;靳巍;吕亚歆;杜雪梅;徐菡;杨晓;孙启鸿;;Smad 3基因剔除对小鼠免疫功能影响的初步分析[A];第七届全军防原医学专业委员会第五届中国毒理学会放射毒理专业委员会学术会议论文汇编[C];2004年

7 孙岩松;杨秀兰;李慕;江其辉;尚士臣;时彦胜;苏玉虹;李文龙;;Smad2基因敲除小鼠冷冻胚胎的研究[A];中国遗传学会“发育、遗传和疾病”研讨会论文汇编集[C];2007年

8 熊杰;卫伟;马兵;夏照帆;李勤;余文林;程飚;;TGF-β1/Smad3信号转导通路对皮肤成纤维细胞调控作用的研究[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年

9 郦佳慧;吕开阳;李恒宇;夏照帆;;LPS诱导的肝脏急性期反应在Smad3基因敲除小鼠中被抑制[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

10 徐国萍;陈琦;许祖德;;Smad7对TGFβ1诱导的肺泡上皮细胞向间质细胞转变的影响[A];中华医学会病理学分会2007年学术年会暨第九届全国病理大会论文汇编[C];2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张雪莹;Smad4的条件性缺失对T细胞活化的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年

2 焦丽燕;荧光差示凝胶电泳技术的建立及其在角质细胞特异性Smad4剔除小鼠表皮差异蛋白质组学研究中的应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

3 周静;人类Smad7的N端结构域（NTD）蛋白质的折叠性质研究[D];上海交通大学;2011年

4 孙勇;联合培养体系中hUVECs对hBMSCs Runx2，，Smad-1基因表达及成骨作用的影响[D];昆明医科大学;2012年

5 张鹏;平滑肌细胞特异性Smad4基因敲除小鼠的建立[D];兰州大学;2010年

6 蒋易楠;GATA2与Smad4相互作用对TGFβ信号通路负调控的初步研究[D];安徽医科大学;2011年

7 曾强林;抑制TGF-β1对慢性环孢素肾病小鼠Smad2/3及ILK信号分子的影响[D];遵义医学院;2013年

8 何欣蓉;TGF-β激活ERK通路的机制探讨[D];重庆医科大学;2006年

9 丁祥云;Bmp4/Smad信号通路在小鼠原始卵泡发育中的作用及作用机制[D];山东大学;2013年

10 余欣欣;苯甲酸雌二醇对去卵巢大鼠皮肤中TGFβ 1/Smad3信号通路的影响[D];南方医科大学;2012年

本文编号：789616