蛋白A亲和层析法纯化单克隆抗体工艺的优化

发布时间：2017-09-09 15:53

  本文关键词：蛋白A亲和层析法纯化单克隆抗体工艺的优化

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【摘要】：治疗性单克隆抗体药物已成为生物医药领域市场最主要的产品类别。蛋白A亲和层析作为第一步捕获抗体蛋白最为有效的手段仍然在现有单克隆抗体纯化平台中占据主导地位。在本研究中,首先开发了一种基于低p H处理抗体细胞回收液的新型细胞液回收技术,该技术能有效去除宿主相关污染物(非组蛋白宿主杂质蛋白、组蛋白、DNA、蛋白聚合物等),同时保证较高的抗体回收率。通过该技术有效预处理后,蛋白A纯化效率可提高10倍左右,并且有效避免了抗体洗脱液中和后浊度的上升,大大减轻了后续蛋白纯化的压力。同时我们也对酸性处理中各种宿主杂质去除机制进行了研究。然后,预处理的洗脱液再经一步Capto adhere色谱纯化,非组蛋白宿主杂质蛋白降低至5 ppm、DNA小于1 ppb、组蛋白降低至检测限以下、蛋白聚合物小于0.01%。总过程抗体蛋白收率87%。该两步法抗体纯化技术可有效集成至当前主流抗体纯化平台,具有良好的大规模应用价值。
【作者单位】： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所中国科学院生物基材料重点实验室;新加坡科技研究局生物处理科技研究院;
【关键词】： 蛋白A 单克隆抗体 纯化 细胞回收液 酸性沉淀 宿主杂质蛋白 组蛋白 DNA
【基金】：中科院青能所所长创新基金(No.Y571061905) 新加坡生物医药研究计划(No.ETPL/12-R15GAP-0009)资助~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 1986年,世界首个单克隆抗体(Monoclonallantibody,简称单抗)获得美国食品与药品监督管理局的上市批准,拉开了单抗药物发展的序幕,成为生物医药领域中最耀眼的明珠。该类药物具有靶向性强、特异性高和毒副作用低等特点,代表了药品治疗领域最新发展方向[1-4]。目前全球医药产业

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本文编号：821366