弓形虫GRA7致密颗粒蛋白与宿主巨噬细胞蛋白的相互作用

发布时间：2017-10-11 12:02

  本文关键词：弓形虫GRA7致密颗粒蛋白与宿主巨噬细胞蛋白的相互作用

  更多相关文章： 刚地弓形虫 致密颗粒蛋白 人碳酸酐酶 蛋白相互作用 纳虫泡

【摘要】：目的鉴定与弓形虫GRA7致密颗粒蛋白相互作用的宿主巨噬细胞蛋白组分,并研究蛋白相互作用与感染过程的相关性。方法建立基于人源THP-1单核巨噬细胞系的弓形虫-巨噬细胞感染模型。以含GST标签的GRA7全长重组蛋白为诱饵,采用GST沉降体外蛋白相互作用方法 ,捕获与诱饵相互作用的人THP-1单核巨噬细胞系成分,采用液相色谱-两级质谱联用(LC-MS/MS)技术鉴定宿主靶蛋白。采用免疫共沉淀(Co-IP)方法验证其体内的相互作用。采用人碳酸酐酶1(h CA1)抗血清为一抗的蛋白质印迹(Western blotting)验证捕获蛋白为宿主h CA1蛋白组分。采用pc DNA3.1(+)真核质粒过表达宿主靶蛋白的方法研究蛋白相互作用与弓形虫感染巨噬细胞的相关性。结果 GST沉降实验捕获的THP-1细胞蛋白组分主要为相对分子质量为Mr29 000的蛋白,质谱鉴定为h CA1。Co-IP实验证明弓形虫GRA7蛋白与宿主h CA1蛋白在感染过程中具有显著体内相互作用。THP-1巨噬细胞内过表达h CA1基因可显著增强弓形虫的繁殖速度和纳虫泡形成速度,但不影响最终繁殖数量。结论弓形虫GRA7致密颗粒蛋白与THP-1巨噬细胞的h CA1蛋白具有显著蛋白相互作用,且该相互作用与弓形虫在THP-1巨噬细胞内的繁殖速度呈正相关。
【作者单位】： 首都医科大学附属北京友谊医院 北京热带医学研究所;北京市热带病防治研究重点实验室;首都医科大学附属北京友谊医院 北京热带医学研究所;
【关键词】： 刚地弓形虫 致密颗粒蛋白 人碳酸酐酶 蛋白相互作用 纳虫泡
【基金】：国家自然科学基金(No.81071375,81301404) 北京市自然科学基金(No.7132042,7144196) 北京市优秀人才培养资助(No.2013D003034000021) 首都医科大学基础-临床科研合作基金(No.13JL16)~~
【分类号】：R382.5
【正文快照】： 弓形虫病是由刚地弓形虫感染引起的世界范围内广泛分布的人兽共患寄生虫病[1,2]。刚地弓形虫的致病机制复杂,其中分泌蛋白与宿主细胞之间的相互作用与感染过程密切相关[3]。弓形虫分泌蛋白包括微线体蛋白(microneme protein,MIC)、棒状体蛋白(rhoptry protein,ROP)和致密颗粒

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 甘绍伯;;弓形虫病的发病机理及病理变化[J];热带病与寄生虫学;2001年02期

2 何小兵;贾怀杰;景志忠;;Toll样受体对病原寄生虫的天然免疫识别[J];生物工程学报;2012年12期

3 洪彩玲;薛峰;黄敏君;甘绍伯;谷俊朝;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA7的全基因原核重组表达[J];中国热带医学;2013年09期

4 苑文英;赵盛;李俊娟;;细胞免疫在弓形虫感染中的作用[J];医学研究与教育;2009年03期

5 彭鸿娟;;刚地弓形虫纳虫泡的形成机制及其作用[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2010年05期

6 郑斌;陆绍红;;刚地弓形虫免疫逃避相关分子的研究进展[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2012年05期

7 刘媛;薛峰;黄敏君;甘绍伯;谷俊朝;;应用生物素标记与蛋白质组学方法分离鉴定弓形虫表面蛋白和分泌蛋白[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2013年01期

8 蒲元华;张德林;;弓形虫入侵宿主机制及免疫学研究进展[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2012年06期

9 都建;安然;程里;陈滢;沈继龙;;酵母双杂交筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2013年01期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 汪涛;余辉;王中平;;弓形虫感染对宿主中枢神经系统的影响[J];动物医学进展;2014年01期

2 汪涛;李金福;李兴暖;梅钧;龙锴;汤自豪;赵志军;;地塞米松对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫感染及细胞因子分泌的影响[J];动物医学进展;2014年07期

3 章海峻;陆春琴;方彩文;;弓形虫感染患儿淋巴细胞亚群及干扰素-γ的变化及临床意义[J];中国当代儿科杂志;2015年07期

4 毛霖;汪习成;杨欣平;张红艳;李正伦;李武;;AIDS合并弓形虫脑病76例临床分析[J];昆明医科大学学报;2015年04期

5 张晓文;;中枢神经系统疾病与弓形虫感染相关性的研究进展[J];热带医学杂志;2011年01期

6 李淑梅;赵慧;;弓形虫简介[J];生物学教学;2012年11期

7 洪彩玲;薛峰;黄敏君;甘绍伯;谷俊朝;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA7的全基因原核重组表达[J];中国热带医学;2013年09期

8 薛峰;黄敏君;洪彩玲;杨英超;甘绍伯;谷俊朝;;弓形虫分泌蛋白ROP5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定[J];中国热带医学;2014年03期

9 李佳佳;鞠玉琳;李杨;王韵篪;刘立本;;桦褐孔菌多糖对感染弓形虫小鼠CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞亚群的影响[J];中国兽医科学;2010年04期

10 唐亚梅;徐彩霞;王艺东;袁芳;彭英;邢诒刚;;获得性非机会性弓形虫脑病临床诊断与治疗(附1例报告)[J];中国神经精神疾病杂志;2008年04期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 赵光伟;四株不同动物来源弓形虫感染小鼠和鸡免疫病理变化的比较研究[D];南京农业大学;2012年

2 张念章;弓形虫CDPKs核酸疫苗及重组亚单位疫苗的免疫保护性研究[D];中国农业科学院;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 宋任浩;;不同献血人群弓形虫抗体检测结果分析[J];中国输血杂志;2009年10期

2 孔令青;李勇;高洪;严玉霖;;生物素-亲和素标记技术[J];动物医学进展;2008年04期

3 许郑林;孙凤娥;胡秀敏;金芸;陈瑞玲;朱凤林;刘玉霞;;沧州市人群弓形虫感染血清流行病学调查[J];环境与健康杂志;2009年02期

4 刘元;李国华;张玉农;梁之斌;;山西省弓形虫人群感染特征分析[J];疾病监测;2008年10期

5 方艳秋,许淑芬,谭岩;TNFα、IL-6、IL-4、IL-2对IFNγ抗弓形虫感染作用的影响[J];免疫学杂志;2000年03期

6 何小兵;房永祥;贾怀杰;陈国华;曾爽;景志忠;;Toll样受体2、4对病毒囊膜蛋白的识别[J];免疫学杂志;2011年10期

7 崔君兆;弓形虫病研究九十年[J];实用寄生虫病杂志;2000年02期

8 景志忠;何小兵;房永祥;陈国华;曾爽;贾怀杰;;机体识别病毒核酸的几种分子模式及途径[J];畜牧兽医学报;2011年03期

9 尹志奎,杨锦楠,许兵红,刘世国;弓形虫GRA7基因在大肠埃希菌中的表达[J];新乡医学院学报;2005年02期

10 李克生;杜惠芬;连晓雯;;人群弓形虫感染及其检测方法的重要性[J];预防医学情报杂志;2009年03期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郑振群;;关于巨噬细胞的几个问题[J];山西医药杂志;1974年12期

2 ;豚鼠巨噬细胞经P_(204)处理后的抗石英细胞毒作用[J];国外医学参考资料(卫生学分册);1976年04期

3 邓侠进;;巨噬细胞的抗癌作用[J];遵义医学院学报;1979年02期

4 陆天才;;疾病对肺巨噬细胞的影响[J];煤矿医学;1982年01期

5 郭瑞清;祝彼得;;一种分离巨噬细胞的简单方法[J];滨州医学院学报;1990年02期

6 谢志坚;巨噬细胞异质性[J];医学综述;2001年06期

7 饶艳;运动及神经内分泌对巨噬细胞功能的调节[J];体育与科学;2002年05期

8 朱金元;;吸烟对肺巨噬细胞的影响[J];浙江医学教育;2003年01期

9 张俊峰;过氧化物酶体增殖物激活受体与单核/巨噬细胞系[J];医学综述;2004年03期

10 韦锦学;顾军;;巨噬细胞的激活诱导死亡[J];生命科学;2006年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 史玉玲;王又明;丰美福;;巨噬细胞激活作用的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年

2 吴国明;周辉;;巨噬细胞和创伤纤维化[A];2009年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2009年

3 李奇;王海杰;;透明质酸对于淋巴结巨噬细胞运动的影响[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

4 刘革修;欧大明;刘军花;黄红林;廖端芳;;丙丁酚在体外能抑制巨噬细胞脂质氧化介导的低密度脂蛋白氧化并调节氧化巨噬细胞的分泌功能[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展（下册）[C];1999年

5 叶金善;杨丽霞;郭瑞威;;环氧化酶-2/前列腺素E_2在血管紧张素Ⅱ刺激巨噬细胞表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子中的作用[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年

6 秦帅;陈希;孔德明;;构建由绿色荧光标记巨噬细胞的转基因斑马鱼系[A];贵州省中西医结合内分泌代谢学术会论文汇编[C];2012年

7 武剑华;徐惠绵;;肿瘤相关巨噬细胞在胃癌中的相关研究[A];第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议论文汇编[C];2014年

8 何军;;血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体升高巨噬细胞内胆固醇水平[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年

9 宋盛;周非凡;邢达;;PDT诱导的凋亡细胞对巨噬细胞NO合成的影响[A];第七届全国光生物学学术会议论文摘要集[C];2010年

10 张磊;朱建华;黄元伟;姚航平;;血管紧张素Ⅱ对巨噬细胞(THP-1重细胞)凝集素样氧化低密度脂蛋白受体表达的影响[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 通讯员 李静 记者 胡德荣;恶性肿瘤巨噬细胞未必皆“恶人”[N];健康报;2014年

2 兰克;以尝试用巨噬细胞治瘫痪[N];科技日报;2000年

3 薛佳;免疫系统——人体的“卫士”[N];保健时报;2009年

4 记者 胡德荣;铁泵蛋白“维稳”铁代谢作用首次阐明[N];健康报;2011年

5 侯嘉 何新乡;硒的神奇功能[N];中国食品质量报;2003年

6 唐颖 倪兵 陈代杰;巨噬细胞泡沫化抑制剂研究快步进行[N];中国医药报;2006年

7 刘元江;新发现解释肿瘤为何易成“漏网之鱼”[N];医药经济报;2007年

8 本报记者 侯嘉 通讯员 何新乡;今天你补硒了吗[N];医药经济报;2003年

9 左志刚;升血小板药使用注意[N];医药养生保健报;2007年

10 记者 许琦敏;“铁泵”蛋白帮助回收铁元素[N];文汇报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 周赤燕;巨噬细胞MsrA对动脉粥样硬化的干预研究[D];武汉大学;2013年

2 章桂忠;TIPE2蛋白调控细胞增殖和炎症的机制研究[D];山东大学;2015年

3 张瑜;DKK1抑制巨噬细胞内脂质沉积及其相关分子机制[D];山东大学;2015年

4 孟涛;异丙酚对心脏收缩功能的抑制作用及其对巨噬细胞分泌功能调节的机制研究[D];山东大学;2015年

5 周兴;基于酵母微囊构建新型口服巨噬细胞靶向递送系统的研究[D];第三军医大学;2015年

6 蒋兴伟;Tim-3对巨噬细胞极化的调控机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2015年

7 刘伯玉;清道夫受体A介导小鼠巨噬细胞吞噬钩端螺旋体研究[D];上海交通大学;2013年

8 杨绍俊;miRNA-155介导ESAT-6诱导巨噬细胞凋亡的分子机制及其在结核诊断中的作用[D];第三军医大学;2015年

9 翟光耀;单核/巨噬细胞Ly6C~(low)亚群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究[D];北京协和医学院;2014年

10 韩露;TRB3介导的脂肪组织巨噬细胞极化与糖尿病冠状动脉病变关系的研究[D];山东大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 马春梅;AP0E~(-/-)小鼠TLR9介导巨噬细胞极化效应对动脉粥样硬化作用的研究[D];福建医科大学;2015年

2 张译丹;盐皮质激素受体拮抗剂调控巨噬细胞表型对实验性矽肺的作用[D];河北医科大学;2015年

3 卢文冉;HCV core蛋白作用的巨噬细胞培养上清对肝细胞生物学性状的影响[D];河北医科大学;2015年

4 李文建;载脂蛋白E影响巨噬细胞因子表达及分型的机制研究[D];河北医科大学;2015年

5 曹爽;高糖对巨噬细胞TLR4信号转导的调节作用[D];河北医科大学;2015年

6 宁程程;肿瘤相关巨噬细胞在子宫内膜癌雌激素敏感性中的作用及机制研究[D];复旦大学;2014年

7 高龙;PLD4在肿瘤相关巨噬细胞抑制结肠癌增殖中的作用研究[D];成都医学院;2015年

8 任虹;感染期子宫颈癌U14细胞荷瘤小鼠抑制巨噬细胞CCL5分泌的机制研究[D];河北医科大学;2015年

9 李美玲;双酚A对小鼠腹腔巨噬细胞极化影响的体外研究[D];安徽医科大学;2015年

10 刘琼;黄芪多糖影响巨噬细胞向脂肪细胞趋化的作用及机制研究[D];新乡医学院;2015年

，

本文编号：1012397