基于病毒样颗粒的检测基孔肯雅病毒IgM抗体的MacELISA方法的建立与评价

发布时间：2017-10-11 16:39

  本文关键词：基于病毒样颗粒的检测基孔肯雅病毒IgM抗体的MacELISA方法的建立与评价

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【摘要】：为了建立捕获法ELISA检测基孔肯雅病毒IgM抗体的方法,本研究分离基孔肯雅病毒结构蛋白编码基因CE3-E2-6K-E1基因元件,通过昆虫细胞杆状病毒表达体系,制备病毒样颗粒,免疫昆明鼠制备多克隆抗体,纯化后用辣根过氧化物酶标记,建立一种以羊抗人IgM抗体、VLPs抗原和酶标多克隆抗体为基础的MacELISA检测基孔肯雅病毒IgM抗体的方法,通过商业化质控血清,实验室确诊基孔肯雅热、肾综合症出血热患者和健康人群血清标本对所建立方法进行优化和初步评价,并与德国欧蒙公司商业化CHIKV IgM抗体检测试剂盒IIFA-IgM进行比较研究。所建立方法特异性为99%(99/100),重复性检测板内变异性系数低于10%,板间变异系数低于15%,检测限明显低于IIFA-IgM商业化试剂盒(P0.0001)。结果显示,本方法属常规ELISA方法,操作简单,具有较高的敏感性、特异性,可用于基孔肯雅病毒IgM抗体实验室检测,为该病的诊断和流行病学调查提供新的手段。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;
【关键词】： 基孔肯雅病毒 病毒样颗粒 抗体IgM MacELISA
【基金】：传染病防治重大专项(2013ZX10004101,2011ZX10004-803-006)
【分类号】：R373
【正文快照】： 基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)属披膜病毒科甲病毒属,为单股正链RNA病毒,基因组约为11~12kb,共编码5个结构蛋白和4个非结构蛋白。CHIKV主要经伊蚊叮咬传播,引发以发热、关节疼痛等为主要特征的基孔肯雅热(Chikun-gunya fever,CHIK)。人感染CHIKV,病毒血症期约为7天[1

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 张海林,施华芳,刘丽华,俞永新,自登云,李兆祥,张天寿,崔五全,王志伟,国正鸣,李新年,甲利;从云南省蝙蝠中分离基孔肯雅病毒及血清抗体调查[J];病毒学报;1989年01期

2 张海林,张云智,杨卫红,章域震,米竹青,黄文丽,袁庆虹,王静林;云南省澜沧江下游地区人及动物血清虫媒病毒抗体调查[J];医学动物防制;2004年04期

3 董必军,陈文州,李秀维,刘红兵,陈玉本,阚飙,邝继琛;首次从海南岛蚊虫和蝙蝠中分离出两株基孔肯雅病毒[J];中国媒介生物学及控制杂志;1993年03期

4 施华芳,张海林,自登云,米竹青,李兆祥,刘丽华,俞永新,王志伟,崔伍全;云南首次从患者体内分离到基孔肯雅病毒[J];中国人兽共患病杂志;1990年01期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张海林,施华芳,米竹青,龚正达,国正鸣,李兆祥,自登云,甲利,刀红兵,李新年,戴祥明;蝙蝠自然感染乙型脑炎病毒的研究[J];病毒学报;1990年03期

2 张海林,米竹青,施华芳,自登云;树，

本文编号：1013666