环氧化酶2基因沉默不影响人骨髓间充质干细胞定向分化的能力

发布时间：2017-10-12 09:00

  本文关键词：环氧化酶2基因沉默不影响人骨髓间充质干细胞定向分化的能力

  更多相关文章： 干细胞 骨髓干细胞 人骨髓间充质干细胞 重组慢病毒 环氧化酶基因 基因沉默 成脂分化 成骨分化 成软骨分化 国家自然科学基金

【摘要】：背景:目前环氧化酶2基因沉默在干细胞中的研究还处在初级阶段。目的:构建携带环氧化酶2基因沉默的慢病毒载体,观察其在人骨髓间充质干细胞中的表达,以及其定向分化潜能变化情况。方法:应用重组慢病毒技术构建携带沉默环氧化酶2基因和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,并用其转染体外培养第3代的人骨髓间充质干细胞,以无目的基因的慢病毒转染人骨髓间充质干细胞的实验组和未做处理的人骨髓间充质干细胞分别作为阴性对照组和空白组进行对比。转染后7 d分别提取各组细胞的总RNA和蛋白检测环氧化酶2表达量。对环氧化酶2基因沉默的人骨髓间充质干细胞和正常人骨髓间充质干细胞定向诱导,观察环氧化酶2基因沉默对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力的影响。结果与结论:慢病毒转染3 d后,荧光显微镜下可见人骨髓间充质干细胞发出绿色荧光,阴性对照组转染效率可达90%以上,实验组转染效率达85%以上。RT-PCR和Western blot检测结果显示,环氧化酶2基因在人骨髓间充质干细胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明显抑制。环氧化酶2基因转染对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力无明显影响。
【作者单位】： 青岛大学医学院附属医院;山东省创伤骨科研究所 关节外科;青岛大学附属烟台毓璜顶医院肿瘤科;青岛大学医学院附属医院 中心实验室;双鸭山市人民医院检验科;
【关键词】： 干细胞 骨髓干细胞 人骨髓间充质干细胞 重组慢病毒 环氧化酶基因 基因沉默 成脂分化 成骨分化 成软骨分化 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81171774,81272056)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction基因治疗是随着DNA重组技术的成熟而发展起来的,它是当代医学和生物学的一个新的研究领域[1-2],可通过一定方式将正常基因或有治疗作用的DNA序列导入靶细胞以纠正基因的缺陷或发挥治疗作用,从而达到治疗疾病的目的。近年来,基因治疗已成为生物医学和组织工程

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本文编号：1017796