反枝苋花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

发布时间：2017-10-12 08:43

  本文关键词：反枝苋花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

  更多相关文章： 反枝苋花粉 抑制蛋白 基因表达 纯化

【摘要】：目的克隆表达反枝苋花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin),并鉴定其免疫学活性。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆反枝苋花粉泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个反枝苋花粉profilin的开放阅读框,将其与p ET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,采用Western-blot检测其Ig E结合活性。结果 c DNA核苷酸测序表明反枝苋花粉profilin的全长基因由675个碱基组成,开放阅读框为399 bp,编码131个氨基酸。重组反枝苋花粉profilin在大肠杆菌中可溶性表达,进一步经Western-blot检测具有良好的Ig E结合活性。结论成功地克隆和表达了反枝苋花粉profilin,并具有良好的Ig E应答免疫活性。
【作者单位】： 赣南医学院病原生物学教研室;南昌大学科学技术学院;深圳大学过敏反应与免疫学研究所;
【关键词】： 反枝苋花粉 抑制蛋白 基因表达 纯化
【基金】：国家自然科学基金(811160129、81302553) 广东省工程技术研究开发中心项目(2013158925) 广东省高等学校国际暨港澳台科技合作创新平台项目(2012gjhz0009)
【分类号】：R392.8
【正文快照】： 众多过敏原中,气传致敏花粉是导致气道变态反应疾病的最主要诱因之一。大约有20%的过敏患者吸入大气花粉会出现Ig E介导的过敏性哮喘、过敏性鼻炎等疾病[2]。野苋菜花粉是我国华南地区常见的气传花粉之一,属于苋科,全世界有40多种,多分布在温带气候的欧美国家,在我国各地均有

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 吴凯威;余晓;刘志刚;宋娟娟;张红云;;大豆泛变应原profilin基因的克隆、序列分析和表位预测[J];大豆科学;2007年01期

2 谢水祥;谢琼s，

本文编号：1017770