香烟提取物对血栓调节蛋白与凝血酶结合力的影响

发布时间：2017-10-17 17:26

  本文关键词：香烟提取物对血栓调节蛋白与凝血酶结合力的影响

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【摘要】：目的利用单分子力谱法检测香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)与凝血酶间单分子水平相互作用,探讨吸烟致血管内血栓形成机制。方法构建TM-GFP质粒并转染至COS-7细胞,应用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)分组测力:(1)空白质粒对照组(GFP-Thr);(2)TM-Thr对照组;(3)5%CSE孵育TM-Thr细胞组(CSE-TM-Thr);(4)5%CSE孵育空白质粒细胞组(CSE-GFP-Thr)。结果 (1)TM与凝血酶的相互作用力为(60.90±0.82)pN,成键几率为(22.58±3.95)%,抗体阻断后成键几率为(2.58±2.0)%。(2)与TM-Thr组比较,GFP-Thr组、CSE-TM-Thr组、CSE-GFP-Thr组,3组AFM成键几率明显减低,P0.05;但3组间两两比较差异无统计学意义。在定量TM修饰的硅片表面检测证实CSE同样可减少TM与凝血酶的成键几率。结论吸烟可能通过减少TM与凝血酶结合几率,抑制TM的抗凝作用,从而导致血管内血栓形成。
【作者单位】： 中国人民武装警察部队总医院心内科;中国科学院化学研究所纳米结构与纳米技术实验室;
【关键词】： 香烟提取物 血栓调节蛋白 单分子作用力 原子力显微镜 凝血酶 人脐静脉内皮细胞
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No 81370315)
【分类号】：R363
【正文快照】： 研究表明[1],吸烟是心血管疾病的独立危险因素,它可致凝血功能异常,血栓形成。但是,目前吸烟导致血管内血栓形成的机制仍不明确。血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)是内皮细胞表面一种强的抗凝活性糖蛋白,它和凝血酶1∶1结合导致凝血酶底物发生特异性改变,从而起到抗血栓作用。

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本文编号：1050098