LC3-LpqH自噬靶向性抗结核DNA疫苗的制备

发布时间：2017-10-20 03:15

  本文关键词：LC3-LpqH自噬靶向性抗结核DNA疫苗的制备

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【摘要】：目的制备结核杆菌脂蛋白抗原前体LpqH基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的抗结核DNA疫苗,探究其诱导与靶向自噬的效应。方法构建pCMV-LpqH与pCMV-LC3-LpqH重组质粒并转染RAW264.7细胞,免疫印迹法检测LC-3与LC3-LpqH的表达。转染pCMV-LpqH或pCMV-LC3-LpqH至GFP-LC3-RAW264.7细胞,免疫荧光法观察LC3-LpqH蛋白的定位。结果细胞转染pCMV-LpqH后LC-3表达水平增高。pCMV-LC3-LpqH在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性,并且LC3-LpqH与GFP-LC3体外表达后共定位于自噬体上。结论 pCMV-LC3-LpqH的表达能够增强自噬,并将LpqH抗原靶向定位于自噬体,为设计新型抗结核疫苗提供了新思路。
【作者单位】： 安徽理工大学医学院免疫与检验教研室免疫与感染研究所;淮南东方医院集团总院病理科;
【关键词】： 自噬 结核分枝杆菌 LC LpqH 疫苗
【基金】：国家自然科学基金(61170172,81202294,81172778) 安徽省自然科学基金(1208085QH162) 国家级大学生创新创业训练计划项目(201210361121,201210361112)
【分类号】：R392
【正文快照】： 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染在全球范围内导致的发病率和死亡率居高不下。卡介苗作为唯一临床使用的抗结核疫苗,对于成人肺结核的防治效果极为有限[1],新型抗结核疫苗的研制势在必行。细胞自噬作为真核细胞中胞内成分的分解代谢途径,在抗MTB等胞内寄生

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本文编号：1064929