抗人CA15-3单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光检测体系的建立
发布时间：2017-10-25 03:03
本文关键词：抗人CA15-3单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光检测体系的建立
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【摘要】：目的获得抗人CA15-3单克隆抗体(mAb),建立CA15-3双抗体夹心化学发光检测体系。方法人CA15-3糖抗原免疫小鼠后,通过细胞融合,筛选到阳性杂交瘤细胞。杂交瘤细胞扩大培养后,纯化获得抗CA15-3的mAb。对抗体进行纯度、效价、表位和亚型的鉴定并建立双抗体夹心检测CA15-3化学发光体系,对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性与特异性评估。结果获得5株阳性信号较强的杂交瘤细胞(分别为#3-1-3#5-2-2、#11-2-2、#12-1-3和#16-1-3)。其分泌的抗体效价均大于10-8g/mL,轻链均为κ链,重链#3-1-3为IgG2a、#5-2-2与#12-1-3为IgG2b、#11-2-2与#16-1-3为IgG3。双抗体夹心体系在(0~300)U/mL范围内线性关系良好,其准确度的回收率为97.45%;最低检测限为0.59 U/mL;线性相关系数为0.9978;低高值的变异系数(CV)均小于10%;与肿瘤标志物AFP、CEA、CA50、CA19-9和CA72-4均不交叉。结论成功制备了抗人CA15-3 mAb,建立了双抗体夹心检测CA15-3化学发光体系。
【作者单位】： 东北林业大学生命科学学院;大庆麦伯康生物技术有限公司;东北林业大学大庆生物技术研究院;
【关键词】： 肿瘤标志物 糖抗原CA- 单克隆抗体 化学发光免疫分析
【基金】：黑龙江省发展高新技术产业专项资金(FW11C201) 黑龙江省应用技术研究与开发计划(GC13C122)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： CA15-3是一种相对分子质量(Mr)约为40万的糖蛋白。1984年,Hilkens等[1]从人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成小鼠单克隆抗体(mAb,115-DB);同年Kufu等[2]自肝转移乳腺癌细胞膜制成mAb(DF-3),这两种mAb均可识别同一种糖抗原物质,遂将这种抗原命名为CA15-3。在正常情况下,CA15-3主要
【参考文献】
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【共引文献】
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6 冯s，
本文编号：1091744
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