5型腺病毒载体对人T淋巴细胞的转染及细胞毒性分析

发布时间：2017-10-29 18:24

  本文关键词：5型腺病毒载体对人T淋巴细胞的转染及细胞毒性分析

  更多相关文章： 腺病毒载体 T淋巴细胞 细胞毒性

【摘要】：目的:利用5型腺病毒载体转染人T淋巴细胞,对其转染T淋巴细胞的效率以及细胞毒性进行分析。方法:选取T淋巴瘤Jurkat细胞及原代T细胞,腺病毒按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为20、50、100、200和400对其转染,转染48 h后利用流式细胞术检测转染效率;选取腺病毒转染后的不同时点,利用碘化丙啶染色法分析转染对于细胞周期的影响;利用Annexin V/7-AAD染色法分析转染诱导细胞凋亡情况;利用台盼蓝染色计数法分析转染对活细胞数目的影响。结果:5型腺病毒载体转染T淋巴瘤的效率最高,转染效率随着MOI值的增大而增加;CD8+T细胞和CD4+T细胞的转染效率大致相同,T细胞经刺激活化后,CD8+T细胞的转染效率下降;病毒转染未导致明显细胞凋亡;病毒转染对细胞周期与活细胞数目没有显著影响。结论:5型腺病毒载体转染T细胞呈现较低细胞毒性。
【作者单位】： 广东药学院生命科学与生物制药学院;广东药学院广东省生物技术候选药物研究重点实验室;永州职业技术学院基础医学部;
【关键词】： 腺病毒载体 T淋巴细胞 细胞毒性
【基金】：科技部“重大新药创制”科技重大专项“十一五”计划项目(No.2009ZX09103-708) 国家自然科学基金资助项目(No.31100664;No.31300737;No.81303292) 东莞市科技计划项目(No.2011105102027)
【分类号】：R393
【正文快照】： T细胞通过膜表面的T细胞受体(T-cell recep-tor,TCR)发挥抗原识别作用[1-2]。利用抗原特异性TCR基因修饰T细胞进行过继性移植/回输,在抑制肿瘤生长、控制病毒感染等方面具有良好的前景[3-4]。腺病毒载体因具有能感染增殖和非增殖细胞、无插入致突变性、能同时表达多个外源基

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 张文峰;张巨峰;邵红伟;王俊伟;牟艳芳;黄树林;;人TCA-12-2/TCB-7.1真核双表达载体的构建与表达[J];中国病理生理杂志;2008年03期

【共引文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 马方宇;不同载体转染多发性骨髓瘤细胞株转染效率的比较[D];中南大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 胡丽彩,邱曙东,黄树林,刘璋,林月霞,罗利琼;TCRVβ7.1基因修饰T细胞对乳腺癌细胞杀伤作用的研究[J];中国免疫学杂志;2003年02期

2 胡丽彩,黄树林,邱曙东,罗利琼,林月霞;TCR Vβ7.1基因对IL-12基因修饰乳腺癌细胞的识别和杀伤作用[J];中国免疫学杂志;2003年05期

3 吕丽珊;王金全;邵红伟;黄树林;;TCRVβ7.1基因修饰的T细胞对肝癌细胞体外杀伤及体内靶向识别作用的研究[J];中国医药生物技术;2007年06期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 马道新,刘春生,陈学良,姜义荣,李湘新,倪淑琴;双自杀基因慢病毒转移系统的建立及其对T淋巴细胞的体外杀伤作用[J];基础医学与临床;2005年08期

2 黄呈辉;欧阳玲;黄建国;黎淦平;江鹏飞;姚集鲁;;HBV抗原基因修饰树突状细胞疫苗体外抗HBV的作用[J];世界华人消化杂志;2006年19期

3 杨新星;郝友华;宋娜;陈玲;刘贽;杨东亮;;HBV抗原肽-HLA-A*2402复合物四聚体的构建及初步检测应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年10期

4 祝恒成,陈江华,何强,刘修恒,程洪涛;IκBα突变体基因修饰树突状细胞降低同种T细胞的反应性[J];中华器官移植杂志;2005年08期

5 王雪莲;王冬冬;谷秋红;李维;安春丽;;Tetramer技术检测人乳头瘤病毒抗原特异性T细胞条件的优化[J];微生物学杂志;2010年04期

6 王剑;沈立松;;Toll样受体在调节性T细胞增殖和功能中的作用[J];国际检验医学杂志;2008年04期

7 陈静韵,丁焕文,王捷,杨汝德;用于骨移植的hCbfa1重组腺病毒载体的构建[J];华南理工大学学报(自然科学版);2005年08期

8 吕金星;严春寅;侯建全;浦金贤;平季根;温端改;;人血红素氧合酶-1重组腺病毒的构建与鉴定[J];江苏医药;2006年11期

9 姜友昭;张玲;周艳;陈兵;;小鼠PPARδ腺病毒载体的构建及其在INS-1细胞中的表达[J];第三军医大学学报;2007年01期

10 鄂群;朱蓓;王东林;;兔肌腱组织石蜡切片的制备[J];中国修复重建外科杂志;2007年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 王桂兰;鲁继荣;成焕吉;马青山;张云峰;;高滴度含有目的基因IL-4RA的逆转录病毒的包装和浓缩[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

2 刘金娟;马翔;;小鼠HSP27基因腺病毒表达载体的构建与鉴定[A];第四届长三角妇产科学术论坛暨浙江省2009年妇产科学术年会论文汇编[C];2009年

3 刘潇聪;陈耀凯;;腺病毒体外介导CTLA4-Ig在L02细胞中的表达及其生物学活性[A];全国第3届中西医结合传染病学术会议暨中国中西医结合学会传染病专业委员会第2届委员会议论文汇编[C];2010年

4 张春燕;李方和;龚劲松;陈妍;;抗腺病毒载体单克隆抗体的制备及其初步鉴定[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

5 张子阳;袁春玉;杨亦彬;;人促血管生成素1腺病毒载体的构建[A];贵州省医学会肾脏病学分会2008年学术年会论文汇编[C];2008年

6 傅跃先;张强;康权;甘立强;罗庆;刘燕;;腺病毒介导骨形态蛋白-9基因转染脂肪干细胞的实验研究[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

7 樊彩斌;温端改;欧阳骏;侯建全;严春寅;浦金贤;李纲;农绍军;;编码IKK2dn重组腺病毒载体的构建及表达验证[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

8 赵平;马道新;纪春岩;;HLA特异的HCMV多表位Ad5F35腺病毒载体核酸疫苗的制备[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

9 张金康;孟国林;刘建;胡蕴玉;毕龙;袁志;段春光;李丹;刘民;白峰;黄鑫;禚文昆;马煜;;腺病毒介导入VEGF165和ANG-1双基因转染大鼠BMSCs及对其增殖的影响[A];第十九届中国康协肢残康复学术年会论文选集[C];2010年

10 鲁茁壮;倪芳;胡泽斌;王立生;吴祖泽;;5型腺病毒载体纤维顶球改造及对血液细胞的感染效率研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 记者 李天舒　通讯员 朱丹萍;一研究证实腺病毒载体依然是安全的[N];健康报;2011年

2 刘永铭;T淋巴细胞加重动脉粥样硬化[N];中国中医药报;2003年

3 张桀;人体免疫系统在太空是否依旧“勤奋”[N];大众科技报;2002年

4 储国强 王坤;我国科学家培育出杀灭肿瘤的细胞[N];中国水利报;2000年

5 网讯;我国科学家培育出新型杀瘤细胞[N];医药经济报;2000年

6 祁岩超;培养缉拿癌细胞的“干警学校”[N];健康报;2002年

7 ;C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物的提纯及其抑瘤作用的研究[N];中国医药报;2003年

8 陶春祥;用于临床的基因工程药物[N];中国医药报;2001年

9 本报记者 柴永忠 本报特约记者 唐向东 本报特约通讯员 肖鑫;发现免疫学“新大陆”[N];解放军报;2005年

10 加闻;加拿大非典疫苗研究获新进展[N];医药经济报;2003年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 马驰;小鼠小肠上皮细胞间淋巴细胞（iIEL）与脾T淋巴细胞间基因表达差异的分析与iIEL功能初步研究[D];中国协和医科大学;2002年

2 吴成君;Ad35腺病毒载体构建及病毒蛋白免疫原性研究[D];北京协和医学院;2009年

3 于彬;六邻体嵌合型重组5型腺病毒载体逃避预存免疫的研究[D];吉林大学;2012年

4 孟晓静;新型抗体HLA-肽多聚体的制备及其对特异性CTLs的检测和诱导的研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年

5 席启林;维生素D受体调控尿钙重吸收的分子机制研究[D];华中科技大学;2010年

6 徐尤年;血管生成素1腺病毒载体的构建及其对内毒素性肺损伤炎症消退的影响[D];华中科技大学;2010年

7 张继业;对BMP-9诱导成骨、成脂肪作用的调节研究[D];重庆医科大学;2013年

8 于铁成;关于低能冲击波对T淋巴细胞的作用及其作用机理的探讨[D];吉林大学;2004年

9 樊超;可诱导共刺激分子在白塞病免疫病理过程中的作用机制[D];华中科技大学;2007年

10 王蕾;DMT1腺病毒表达载体的构建和功能研究[D];青岛大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 宋付凯;高表达hRAMP1基因腺病毒载体的构建及其在兔MSCs中表达的实验研究[D];遵义医学院;2010年

2 魏菁;腺病毒介导ChM-I基因抑制BMSCs体内构建的软骨血管化的实验研究[D];西北大学;2010年

3 苏秀云;应用AdEasy腺病毒载体系统构建携带人骨形成蛋白2基因的重组腺病毒[D];第一军医大学;2005年

4 李斐;腺病毒介导的CNTF基因在大鼠脊髓表达的实验研究[D];河北医科大学;2011年

5 孙坚萍;EBV即刻早期基因BZLF1腺病毒载体的构建和表达[D];青岛大学;2005年

6 倪芳;血液细胞靶向性腺病毒载体的构建及功能检测[D];安徽医科大学;2006年

7 陈铭佳;脾虚证动物模型的差异性研究[D];黑龙江中医药大学;2005年

8 张萍;间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖减轻移植物抗宿主病机制研究[D];郑州大学;2006年

9 王潇潇;呼吸道合胞病毒F蛋白编码基因重组腺病毒载体的构建及表达[D];北京生物制品研究所;2006年

10 孙业庆;携带IKK2dn基因重组腺病毒载体的构建及表达验证[D];苏州大学;2008年

，

本文编号：1114157