人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2017-10-31 20:17

  本文关键词：人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定

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【摘要】：目的原核表达白细胞介素37(IL-37)及制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增IL-37b成熟肽编码区基因,克隆至表达载体pET28a,转化大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化重组蛋白,以纯化的重组蛋白IL-37为免疫原免疫BALB/c小鼠制备其特异性抗体,用ELISA、Western blot法和免疫组织化学染色检测抗体的效价和特异性。结果原核表达了重组蛋白IL-37b成熟肽,并获得高效价的小鼠抗IL-37抗体,能特异性识别天然的IL-37抗原。结论成功制备效价高、特异性好的小鼠抗IL-37抗体。
【作者单位】： 广东医学院广东省医学分子诊断重点实验室;广东医学院临床免疫学教研室;
【关键词】： 白细胞介素 表达 抗体 制备 小鼠
【基金】：广东省自然科学基金(S2012040006383) 广东省大学生创新训练计划(1057113038)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 2000年Kumar等[1]经序列分析鉴定出白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)家族存在一个新成员,其后认定为IL-1家族第7个成员[2],但对其具有的生物学功能则不知晓。直到2010年Nold等[3]研究发现它对炎症反应和固有免疫具有明显的抑制作用,并命名为IL-37。IL-37是一个新型的抗炎细胞

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 何玲鸽;赵付前;林妙芬;祝惠钦;王森;陈章权;;IL-37b基因克隆及其真核的表达载体构建[J];山东医药;2013年39期

2 尹成凯;于艺雪;任桂萍;李宁;姜媛媛;徐彤;李德山;;人IL-1β的克隆及其高效可溶性表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年10期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 李宁;徐黎明;李天鹤;任桂萍;陈睿;张宇;阚方明;叶贤龙;谷学佳;丁良君;李德山;;具有中和活性的抗人IL-1β单链抗体的构建[J];免疫学杂志;2011年07期

2 刘生伟;任桂萍;傅俊华;刘铭瑶;李宁;郝建权;李德山;;利用SUMO系统高效可溶性表达重组人TNF-α[J];细胞与分子免疫学杂志;2010年05期

3 李天鹤;任桂萍;徐黎明;周兵;郭茉;齐剑英;张宇;赵景壮;于引航;尹杰超;李德山;;抗人IL-1β单链抗体的构建及其中和活性的检测[J];中国免疫学杂志;2013年03期

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 石颖;喷鼻流感三价裂解疫苗的制备和免疫效果的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年

2 贺生芳;Intein介导的纳米抗体在大肠杆菌中的可溶性表达与纯化[D];西北农林科技大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 柯庆喜;张志伟;赵付前;何玲鸽;陈章权;;肿瘤坏死因子-α对人滑膜成纤维细胞白细胞介素-37表达的影响[J];实用医学杂志;2013年05期

2 唱韶红,吴军,巩新;IL-1β的基因克隆及在原核中的表达[J];微生物学报;2002年03期

3 邓存良;黄捷;陈文;王明勇;陈枫;;IL-1受体拮抗剂对大鼠肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及TIMP-1 mRNA表达的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年06期

【相似文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 任泽鹏;IL-37对THP-1源巨噬细胞泡沫化的影响[D];华中科技大学;2013年

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本文编号：1123590