诱导多能干细胞建系及体外造血祖细胞定向分化体系的建立

发布时间：2017-11-01 12:19

  本文关键词：诱导多能干细胞建系及体外造血祖细胞定向分化体系的建立

  更多相关文章： 诱导多功能干细胞 胚状体 造血干细胞 细胞分化 干细胞 培养 诱导多能性干细胞 类胚体 造血祖细胞 体外分化

【摘要】：背景:目前,大量文献报道了诱导多能性干细胞系的建立,但大规模体外诱导分化造血祖细胞的研究还缺乏深入的探讨。目的:建立诱导多能性干细胞体外定向诱导形成造血祖细胞的方法。方法:采用慢病毒感染的方法将含有Oct4、Sox2、Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞,获得了诱导多能性干细胞;在诱导分化体系中添加了Y-27632,克服干细胞扩增中的凋亡现象;运用OP9细胞产生的条件培养液建立诱导多能性干细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系。结果与结论:①前3代细胞克隆传代时,诱导多能性干细胞发生凋亡的现象很多,很难大规模扩增培养。培养基中添加阻断ROCK活化的抑制剂,能够明显抑制胚胎干细胞的凋亡。②诱导多能性干细胞在OP9细胞条件培养液作用下,经过体外诱导分化,形成CD34+造血祖细胞。
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属仁济医院整形外科;上海交通大学医学院附属仁济医院消化研究所;上海交通大学微纳米科学技术研究院生物纳米科学工程研究室;
【关键词】： 诱导多功能干细胞 胚状体 造血干细胞 细胞分化 干细胞 培养 诱导多能性干细胞 类胚体 造血祖细胞 体外分化
【分类号】：R329
【正文快照】： 文章亮点:1将含有Oct4,Sox2,Nanog和Lin28因子的4种慢病毒和人皮肤成纤维细胞共同孵育后,成功进行诱导多能性干细胞建系,在诱导分化体系中添加了Y-27632,克服干细胞扩增中的凋亡现象。2运用OP9细胞产生的条件培养液建立诱导多能性干细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系,

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 单威;余勤;王标;刘丽珍;刘森泉;付珊;刘伟;周丽萍;;逆转录病毒方法建立小鼠诱导性多能干细胞的实验研究[J];浙江中医药大学学报;2013年02期

2 林凤秋;李剑平;;胚胎干细胞和诱导多能性干细胞在输血医学上的应用潜能[J];中国输血杂志;2013年03期

3 石嵘;周珏宇;郑文岭;马文丽;;诱导性多潜能干细胞技术及应用研究进展[J];基础医学与临床;2013年01期

4 刘婷;王立斌;朱永朝;金毅然;李玉奎;魏军;;应用小鼠早期胚胎活性因子诱导小鼠成纤维细胞再程序化为多能干细胞的实验研究[J];吉林医学;2013年35期

5 骆玉梅;范勇;陈欣洁;岳磊;黎青;余波澜;何文智;马晓燕;孙筱放;;以4种基因诱导产前诊断绒毛细胞建立诱导性多能干细胞[J];中国组织工程研究;2013年01期

6 姚帅辉;钟德君;;诱导多能干细胞移植在脊髓损伤修复中的应用及研究进展[J];中国脊柱脊髓杂志;2013年11期

7 赵星;黄元华;马燕琳;;诱导多能干细胞与细胞重编程技术的研究与未来[J];中国组织工程研究;2013年49期

8 董溪溪;张彤;曹均凯;;关于诱导性多潜能干细胞成骨分化的研究进展[J];中华老年口腔医学杂志;2013年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李紫聪;黄晓灵;刘德武;吴珍芳;;转基因动物生物反应器研究进展[J];广东畜牧兽医科技;2013年04期

2 常胜合;徐立;李敬阳;孙威;王甲水;许桂莺;孙佩光;吴琼;金志强;舒海燕;;提高香蕉胚性愈伤诱导成功率的可能途径[J];安徽农业科学;2013年19期

3 姜英浩;张菊;卢兹凡;;干细胞伦理之争的“终结者”——谈诺贝尔生理学与医学奖获得者山中伸弥[J];医学争鸣;2013年05期

4 徐丽萍;龙大宏;校对;;诱导多能干细胞及其在神经再生医学的应用前景[J];解剖学研究;2013年05期

5 Jian Shu;Hongkui Deng;;Lineage Specifers:New Players in the Induction of Pluripotency[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

6 Xiao-Bing Zhang;;Cellular Reprogramming of Human Peripheral Blood Cells[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

7 Wenwen Jia;Wen Chen;Jiuhong Kang;;The Functions of MicroRNAs and Long Non-coding RNAs in Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

8 Yi-ye Zhou;Fanyi Zeng;;Integration-free Methods for Generating Induced Pluripotent Stem Cells[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

9 Menghua Wu;Guilai Chen;Baoyang Hu;;Induced Pluripotency for Translational Research[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

10 Xiao Lu;Tongbiao Zhao;;Clinical Therapy Using iPSCs:Hopes and Challenges[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 贾蓓;A型血友病人非整合诱导多能干细胞建系及其细胞疾病模型的建立[D];南方医科大学;2012年

2 申晶;骨髓源间充质干细胞输注促进STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺内α细胞向β细胞的转变：糖尿病治疗的新模式[D];中国人民解放军军医进修学院;2013年

3 朱玉德;胶质瘤干细胞的生物学特性及其与胶质瘤血管发生的关系[D];苏州大学;2013年

4 丛义梅;猪原始生殖细胞体内跟踪、体外培养及遗传印记的研究[D];东北农业大学;2013年

5 陈雪梅;人胚胎干细胞传代培养和神经诱导分化过程中基因组遗传变异的动态变化[D];郑州大学;2013年

6 李远;杂合型重编程Oct4联合多能干细胞因子表现重编程人脑胶质瘤细胞的研究[D];郑州大学;2013年

7 靳木子;阿尔巴斯白绒山羊与绵羊胚胎干细胞培养技术的研究[D];内蒙古大学;2013年

8 袁建龙;利用体细胞核移植技术生产转基因绒山羊的研究[D];内蒙古大学;2013年

9 梅宇钦;黄酮类化合物库内小分子4a经由PPAR-β-Mfn2-[Ca~(2+)]_M信号调控胚胎干细胞神经分化[D];浙江大学;2013年

10 杨梅;NAIF1基因在胃癌细胞中的功能与机理研究[D];北京协和医学院;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王振;造血系统关键转录因子的慢病毒载体构建及表达[D];山东师范大学;2013年

2 侯歌;胃癌组织中PCNA、Ki-67、Nanog、Oct-4的表达与复发转移的关系[D];郑州大学;2013年

3 陈明;骨髓单个核细胞在脑缺血大鼠脑内受损区域的定向分化[D];郑州大学;2013年

4 张艳玲;E-cadherin、β-catenin及Oct-4、Sox-2表达与胃癌术后复发转移的关系[D];郑州大学;2013年

5 费璇;KLF4在大鼠晶状体损伤促进视神经再生过程中的表达[D];郑州大学;2013年

6 雷学华;重编程因子对小鼠组蛋白H3K4/27甲基化酶基因启动子活性的影响[D];安徽大学;2013年

7 解智慧;干细胞转录调控因子SOX2在食管鳞癌中的表达与临床预后的关系[D];郑州大学;2013年

8 邓玉金;应用小鼠ESCs体外诱导己分化体细胞为iPSCs的异性来源鉴别体系研究[D];西南大学;2013年

9 赵龙彪;乌司他丁对急性心肌梗死大鼠心脏的保护作用[D];河北医科大学;2013年

10 曹玲玲;Hemin诱导K562细胞向红系细胞分化和胞质杂交体的蛋白质组学及NPM1功能的初步研究[D];浙江理工大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 秦彤;苗向阳;;iPS细胞研究的新进展及应用[J];遗传;2010年12期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚慧臣，郭在晨，叶奇鲁，马瑞英;重组人集落刺激因子对脐带血和骨髓造血祖细胞体外培养的影响[J];白血病;1995年03期

2 陈戈煜;CD34~+造血祖细胞定向诱导分化为T/NK细胞的研究进展[J];国外医学.输血及血液学分册;2002年03期

3 王剑锋;白炎;葛忠良;;荧光激活细胞分离技术在造血干、祖细胞分离纯化中的应用[J];国际输血及血液学杂志;1990年06期

4 李秀东,毕晓颖,凌翎,范洪学,王友联;人脐血粒单系及成纤维系祖细胞的体外培养[J];白求恩医科大学学报;1997年05期

5 王亚平,王勇,姜蓉,祝彼得,张淑慎;人参总皂甙诱导造血生长因子生成的实验研究[J];解剖学报;1997年03期

6 史敦云,李明,卓家才,李玉珠,聂李平,汪明春,张晋萍;脐血造血细胞扩增后细胞成分的变化[J];山西医药杂志;2000年06期

7 孙新,黄绍良,刘俊范;胎儿骨髓基质细胞培养上清对造血祖细胞集落生长的影响[J];中国实验血液学杂志;1997年02期

8 郑汝勇;周柱绪;尤玉娟;王桂梅;郭瑞清;;小鼠巨噬细胞对红系血祖细胞增殖的影响[J];医学检验与临床;2008年01期

9 黄成龙;人类造血干细胞研究进展[J];解放军医学情报;1995年01期

10 胡力平，谭汉君，冉崇蓉，魏晓军，张晓飞;脐血输注后再生障碍性贫血、白血病患者造血祖细胞体外培养及血浆造血刺激活性变化[J];中国小儿血液;1996年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 胡采红;周琨;孙汉英;刘文励;;外源性shh蛋白对c-kit+造血祖细胞增殖分化作用研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

2 崔巍;许晓东;许勇钢;汪玄;;采用多功能流式细胞术分析分选造血干细胞和髓系定向分化祖细胞[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

3 柳晓兰;郭德煌;罗庆良;郝静;熊国林;孙连生;邱丽玲;;rhIL-11对照射猴外周血小板数及造血祖细胞恢复的影响[A];中华医学会放射医学与防护学分会第三次全中国青年学术交流会论文摘要汇编[C];2001年

4 陈彤;王征宇;DavidTScadden;陈彤;谢毅;;人胚胎干细胞向造血祖细胞诱导分化的研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年

5 唐佩弦;;造血干祖细胞移植的细胞生物学基础[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展（下册）[C];1999年

6 陈鸿书;甘立霞;曹廷兵;;人白细胞介素-3基因表达的调节的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年

7 唐佩弦;;干细胞基础研究的新进展(下)[A];中国生理学会论文汇编2005年第六期[C];2005年

8 杨默;;TPO的新作用[A];第十一届全国血栓与止血学术会议暨血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展学习班论文摘要汇编及学习班讲义[C];2007年

9 刘文君;陈义;冉伶;郭渠莲;;全反式维甲酸对脐血粒-单系和红系祖细胞HOXB6基因表达的影响[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

10 要晖宇;刘兵;王晓燕;毛宁;;TGF-β_1对小鼠胚胎干细胞来源BL-CFC产生和分化的影响[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

中国重要报纸全文数据库 前8条

1 项盈；王金福;作用于不同周期 参与细胞增殖分化 中药多环节影响造血干/祖细胞[N];中国医药报;2005年

2 周勇;北京大学T淋巴细胞发育研究获新成果[N];中国医药报;2007年

3 明霞;脐血移植优点多[N];大众卫生报;2002年

4 ;武汉一项研究有望大幅提高骨髓移植成功率[N];科技日报;2003年

5 中国医学科学院血液学研究所 张英驰　袁卫平;从皮肤到血液破译生命密码的路还有多远？[N];健康报;2010年

6 文广;我国首例无血缘关系脐带血移植成功[N];医药经济报;2000年

7 罗刚 吴志军;重组干细胞因子研究有进展[N];健康报;2003年

8 袁立新 曾丘林;深圳推出脐血造血细胞分离及冻存新技术[N];中国医药报;2001年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 胡嘉波;脐血造血干/祖细胞分离、纯化、生物学特性及B细胞分化发育研究[D];江苏大学;2008年

2 黄晓兵;骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞支持脐血造血干/祖细胞培养研究[D];四川大学;2006年

3 袁燕;体外扩增人脐血造血干祖细胞方法初步研究[D];复旦大学;2008年

4 薛兴奎;趋化分子LTD4、S1P和SDF-1对造血干细胞作用及其机制的研究[D];浙江大学;2007年

5 魏斌;小鼠胎盘造血功能的实验研究[D];山东大学;2008年

6 李剑平;Notch信号通路在同基因造血干/祖细胞移植诱导免疫耐受中的作用[D];第四军医大学;2008年

7 廖荣霞;造血干细胞发育相关miRNAs的筛选及其功能初步研究[D];第三军医大学;2007年

8 谭竞;一种拟生态造血干细胞龛对造血干/祖细胞的维持和扩增研究[D];四川大学;2007年

9 刘雨潇;人胚胎干细胞向造血细胞诱导分化的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年

10 秦迎松;人促血液血管细胞生成素（Haemangiopoietin, HAPO）单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王红艳;CD34+造血祖细胞上CXC趋化因子受体3的表达及其配体γIP-10和Mig诱导的趋化性和粘附性研究[D];安徽医科大学;2001年

2 黄薇薇;GST-hDSL蛋白的原核表达和纯化及其鸡卵黄抗体的制备[D];上海交通大学;2007年

3 王晓健;NO对造血细胞的影响[D];浙江大学;2001年

4 胡采红;Wnt与Notch信号通路调控造血发育机制研究[D];华中科技大学;2010年

5 冯静乔;人类巨细胞病毒感染对淋巴系祖细胞增殖过程中HOXC4、HOXC6基因表达的影响[D];泸州医学院;2007年

6 高文瑾;脐血CD133～+细胞分选及其体外扩增的研究[D];苏州大学;2005年

7 高志云;HCMV感染对血管内皮细胞ICAM-1表达的影响及药物干预的作用[D];河北医科大学;2005年

8 杨斌;造血干细胞体内衰老模型的构建及相关生物学研究[D];重庆医科大学;2010年

9 李彩霞;细胞因子在外周血干细胞动员中的作用及其对多发性骨髓瘤细胞生物行为的调节[D];苏州大学;2001年

10 曾宇然;PCNA反义核酸对脐血CD34+造血干/祖细胞体外扩增的影响[D];汕头大学;2005年

，

本文编号：1126803