小鼠骨髓来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

发布时间：2017-11-07 13:01

  本文关键词：小鼠骨髓来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

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【摘要】：目的:探讨自小鼠骨髓分离培养内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)的方法及其鉴定和生物学特性。方法:密度梯度离心法分离获取小鼠骨髓单核细胞,培养于EGM-2 SingleQuots培养液中,每天于倒置显微镜下观察EPC的形态。应用细胞免疫荧光法、流式细胞技术鉴定EPC表面抗原标志CD34、血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2),荧光显微镜检测EPC吞噬DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-AC-LDL)及结合FITC标记的荆豆凝集素(FITC-UEA-lectin)功能。结果:早期EPC呈长梭形,细胞群落可呈现线状、管状、网状生长状态,培养7 d后出现干细胞集落,并逐渐增多;培养3周后,细胞集落逐渐消失,细胞呈现铺路石样生长状态。培养获得的EPC绝大部分可同时表达细胞表面标记物CD34及VEGFR2,并具有吞噬DiI-AC-LDL及结合FITC-UEA-lectin功能。结论:自小鼠骨髓中分离、培养、纯化EPC是一种方便、经济、高效的培养方法。通过该方法培养获得的EPC增殖能力强,数量充足,生物学特性稳定。该方法对今后利用EPC进行细胞移植治疗的相关实验有着重要意义。
【作者单位】： 南京大学临床医学院南京军区南京总医院心胸外科;
【基金】：国家自然科学基金项目资助(81101723)
【分类号】：R329
【正文快照】： 血液循环是机体生命维持的重要保证。血管内皮作为血液与周围组织的分界,在血液循环的稳定性的维持中起着非常重要的作用[1]。自1997年Asahara首次报道经由外周血获得内皮祖细胞(endothelialprogenitor cell,EPC)以来,EPC因其具有的强大增殖潜能及向血管内皮细胞分化的特性,越

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本文编号：1152498