全骨髓贴壁接触培养SD大鼠骨髓间充质干细胞

发布时间：2017-11-11 06:23

  本文关键词：全骨髓贴壁接触培养SD大鼠骨髓间充质干细胞

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【摘要】：背景:体外分离培养出生长状态好、高纯度、增殖能力强和数量充足的大鼠骨髓间充质干细胞,是将其作为种子细胞用于组织和细胞移植的重要前提。目的:建立简便、快速、有效的SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养方法,并观察其生物学特性。方法:采用全骨髓法将SD大鼠双侧股骨和胫骨骨髓细胞进行体外分离培养,贴壁接种法进行细胞纯化、传代。观察细胞生长形态及特征,绘制细胞生长曲线,检测细胞表面标记物,采用体外诱导剂诱导细胞分别向成骨、成软骨、成脂方向分化。结果与结论:全骨髓贴壁接种法分离培养的骨髓间充质干细胞生长旺盛、纯度高,细胞生长形态呈长梭形,极性排列,细胞生长呈S形生长曲线,群体倍增时间为29 h,细胞在连续传10代后仍具有较强的增殖能力。第3代骨髓间充质干细胞的表面标记物CD44、CD29、CD90均呈阳性表达,CD45、CD34、CD11b则呈阴性表达。第3代骨髓间充质干细胞分别经成骨、成软骨、成脂诱导剂诱导后,茜素红染色、碱性磷酸酶染色、von-kossa矿化结节染色、甲苯胺蓝染色和油红O染色均呈阳性。结果验证全骨髓贴壁接种法是一种简便可靠的体外分离培养方法,能获得纯度较高的骨髓间充质干细胞,经实验鉴定第3代骨髓间充质干细胞生物活性最佳,且具有多向诱导分化能力,适合作为后续实验的种子细胞。
【作者单位】： 大连医科大学附属第二医院骨外科;
【基金】：辽宁省科学技术计划项目基金(2011225013),课题名称:NEP1-40与NT-3基因修饰的骨髓间充质干细胞联合应用对脊髓损伤修复作用的实验研究~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction近来研究表明,骨髓间充质干细胞(bone marrowmesenchymal stem cells,BMSCs)不但具有来源广泛、易于获取、增殖迅速、可自体移植、体外基因转染率高等特点,而且在不同诱导剂培养下可分别诱导分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞及肝细胞等[1-4]

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 董晨辉;王子明;杜全印;王雨;黄恺;王爱民;;金黄色葡萄球菌肠毒素C_2对兔骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的实验研究[J];创伤外科杂志;2013年05期

2 张锋;胡昌龙;陈波;李巧玉;;Ad-VEGF-骨髓间充质干细胞移植在脑梗死治疗中的作用[J];国际神经病学神经外科学杂志;2013年Z1期

3 蒋涛;任先军;阴洪;周长立;王开见;;大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及多向分化研究的体外实验[J];脊柱外科杂志;2013年05期

4 羊明智;彭立军;胡文凯;;甲钴胺体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化[J];中国组织工程研究;2013年32期

5 陈增生;褚强;刘艳凤;宋璇;李萍;;诱导剂共培养:谁更适宜骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化?(英文)[J];中国组织工程研究;2013年32期

6 杨陆蒙;李新喜;白超;王洋;田野;罗军;;大鼠骨髓间充质干细胞培养方法的比较及细胞鉴定[J];新疆医科大学学报;2013年10期

7 尤青青;戴春;;骨髓间充质干细胞移植对大鼠糖尿病肾病保护作用的研究[J];中华临床医师杂志(电子版);2013年10期

8 何微;吴添文;黄雷;赵为民;夏颖;唐芳;牟玉莲;李奎;;h1-calponin基因对五指山小型猪骨髓间充质干细胞体外成骨分化的影响[J];中国农业科学;2013年17期

9 丁影;邹天慧;刘慧竹;王U嗢，

本文编号：1170202