乙型肝炎病毒X蛋白升高细胞内钙离子机制研究
本文关键词:乙型肝炎病毒X蛋白升高细胞内钙离子机制研究
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【摘要】:目的研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)调节细胞内钙离子可能的分子机制,揭示乙型肝炎病毒(HBV)诱导肝癌的可能途径。方法培养人胚肾细胞(HEK293),取第2代HEK293细胞共转染HBx基因、钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)基因或者间质相互作用因子1(STIM1)基因,免疫共沉淀(co-IP)实验观察细胞内蛋白结合情况,并使用谷胱甘肽巯基转移酶(GST)pull-down实验研究HBx与Orai1作用位点,使用钙离子测量/成像系统检测HBx蛋白对细胞内钙离子的影响。结果转染后细胞生长状态良好,co-IP实验结果显示HBx蛋白在细胞内可以与Orai1蛋白结合,GST pull-down实验显示HBx蛋白可以与Orai1蛋白C末端结合,钙离子测量/成像系统检测显示HBx蛋白可升高活细胞钙内流。结论 HBx蛋白通过与细胞膜钙离子通道Oria1结合蛋白的C末端结合,增加细胞钙内流,扰乱细胞内钙离子平衡,从而影响细胞增殖等活性。
【作者单位】: 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(No.81001063)
【分类号】:R373.21
【正文快照】: 原发性肝细胞性肝癌(HCC)是最常见的原发恶性肿瘤之一,死亡率极高,其中乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染是其主要致病因素[1-3]。在HBV引发的HCC中,HBV的病毒表达产物乙型肝炎病毒x(HBx)蛋白起着重要的作用[4]。HBx蛋白作为细胞的反式激活因子可以调节很多细胞信号传导通路,可以调节
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