CM-DiI标记兔外周血平滑肌祖细胞可行性分析

发布时间：2017-11-13 12:33

  本文关键词：CM-DiI标记兔外周血平滑肌祖细胞可行性分析

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【摘要】：采用荧光染料CM-DiI标记兔外周血平滑肌祖细胞(SPC),评价其生物可行性.分离和培养SPC,采用CMDiI进行标记,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测标记效果和传代后的细胞标记率.同时,进行细胞爬片培养后免疫荧光染色,观察标记后细胞表达平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙调节蛋白(Calponin)和增殖细胞核抗原(PCNA)的情况.进行台盼蓝排斥实验、细胞粘附实验、细胞增殖实验和细胞迁移实验,观察标记后的SPC存活率以及粘附、增殖和迁移能力的变化.结果发现,培养4d左右可见SPC开始生长,一周后出现SPC克隆.通过免疫荧光和流式细胞术分析,CM-DiI标记率为96%左右,连续传代2周后标记率仍在40%以上.标记后的细胞可表达α-SMA、Calponin和PCNA.同时发现,标记后的细胞存活率无明显降低,细胞粘附能力、增殖能力和迁移能力无明显改变.本研究证明采用CM-DiI标记SPC操作简便,效果好,不改变细胞表型,不影响细胞的存活率和粘附、增殖及迁移能力,可作为SPC的荧光示踪剂.
【作者单位】： 南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿男科;上海市第十人民医院;同济大学附属第十人民医院泌尿外科;
【基金】：国家自然科学基金(31100702/C100307,81170563/H0415) 高等学校博士学科点专项科研基金(20110072120054)
【分类号】：R329
【正文快照】： 组织工程膀胱是近年来随着组织工程技术的发展而发展起来的一个科学领域.膀胱平滑肌细胞在膀胱的储尿和排尿功能中承担了重要的角色.因此,平滑肌的再生是构建组织工程膀胱的关键环节.寻求一种合适种子细胞以利于平滑肌的再生已经成为组织工程膀胱成功的关键因素[1].平滑肌祖

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 杨斌;陈，

本文编号：1180739