乙肝病毒HBx基因稳转细胞系的建立及其诱导的内质网应激
本文关键词：乙肝病毒HBx基因稳转细胞系的建立及其诱导的内质网应激
【摘要】：目的建立乙肝病毒(HBV)HBx基因稳转细胞系,并观察该细胞系的增殖活性及内质网应激相关基因的表达情况。方法采用RT-PCR法从HepG2.2.15细胞株中克隆HBx基因编码区片段,构建pcDNA3.1-HBx真核表达质粒。利用脂质体将pcDNA3.1-HBx转染至人HepG2细胞系,通过G418筛选后,经Western blot法对HBx的表达进行验证。并用MTT法检测细胞的增殖活性,同时观察过表达HBx蛋白对内质网应激相关基因表达的影响。结果成功构建了HBx的真核表达质粒;建立了HBV HBx基因稳转细胞系;MTT法检测显示该细胞系增殖活性明显上升;同时也发现HBx基因的过表达可上调内质网应激相关基因BiP、PERK、ATF6、XBP1、MANF的表达,而CHOP的表达降低。结论 HBx基因过表达可诱导内质网应激,并促进HepG2细胞增殖。
【作者单位】： 安徽医科大学基础医学院;安徽医科大学生物药物研究所;
【基金】：国家自然科学基金(编号:81173074、91129729、81372576)
【分类号】：R373.21
【正文快照】： 乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染引起的慢性乙型肝炎被普遍认为是导致肝癌发生的重要因素。据统计,我国半数以上的肝癌患者有慢性乙肝病史。研究[1-3]显示亚洲和北美地区乙肝抗原阳性携带者罹患肝癌的比例是非感染人群的25~37倍。HBV是嗜肝DNA病毒家族的溶原性病毒,基因
【共引文献】
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