结核分枝杆菌Rv1886c的原核表达及其免疫生物学特性

发布时间：2017-11-18 06:25

  本文关键词：结核分枝杆菌Rv1886c的原核表达及其免疫生物学特性

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【摘要】：【目的】Rv1886c基因编码的Ag85B是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)感染早期的分泌蛋白,本研究对其所诱导的免疫应答特性进行了探索。【方法】对Ag85B进行原核表达和鉴定,并通过夹心ELISA、间接ELISA及ELISPOT方法测定其诱导的细胞免疫和体液免疫应答水平。【结果】SDS-PAGE及Western blot鉴定结果表明,以包涵体形式表达的Ag85B蛋白,经变性、复性后能与结核病人的抗血清及免疫重组李斯特菌LM-Ag85B的小鼠抗血清发生特异性反应,表明His-Ag85B融合蛋白具有较好的免疫活性。将纯化的Ag85B蛋白皮下免疫C57BL/6小鼠,夹心ELISA的测定结果表明,Ag85B蛋白免疫组诱导小鼠产生的特异性IFN-γ水平显著高于IL-4的水平(P0.001),呈现Th1型细胞免疫应答趋势;以结核菌素PPD作为包被抗原,通过间接ELISA测定的血清抗体效价达到1∶6400,表明Ag85B也能诱导有效的体液免疫应答。此外,以尾静脉途径初次免疫小鼠42天时,ELISPOT测定结果显示,结核分枝杆菌H37Rv诱导小鼠产生Ag85B240-259特异性的IFN-γ水平极显著高于卡介苗(BCG)免疫组(P0.001)。【结论】Ag85B蛋白能激发小鼠产生较强的Th1型细胞免疫应答和较好的体液免疫应答;BCG单次免疫后诱导小鼠产生的Ag85B特异的细胞免疫应答水平较低。本研究为揭示结核分枝杆菌的致病机理、新型疫苗的研制和早期诊断试剂的开发奠定了基础。
【作者单位】： 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
【基金】：国家“973项目”——国家重点基础研究发展计划(2012CB518805) 江苏省自然科学基金(BK2011446) 2012年度国家级大学生创新创业训练计划项目(201211117021) 国家自然科学基金(31101841)~~
【分类号】：R378.911
【正文快照】： 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)是人类结核病(tuberculosis,TB)的主要元凶,每年导致200-300万人的死亡,新增TB患者800万人,对人类健康所造成的严重威胁已引起了全球的高度关注[1]。有效的早期诊断方法和及时治疗是控制TB传播的重要手段[2]。结核分枝杆菌的表

【参考文献】

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【相似文献】

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1 张e，

本文编号：1198845