特异性TCRαβ基因转染T细胞促进抗肿瘤免疫的研究

发布时间：2017-11-19 14:14

  本文关键词：特异性TCRαβ基因转染T细胞促进抗肿瘤免疫的研究

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【摘要】：目的:研究肝癌特异性TCR基因TCRVα12.2-Vβ7.1转染T细胞后,促进T细胞识别肿瘤抗原,活化抗肿瘤免疫反应的效果。方法:构建重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV,以之感染T细胞并优化最佳感染条件。钙黄绿素染色法检测T细胞对不同肿瘤靶细胞株的杀伤活性。Annexin V-PI双染法检测靶细胞凋亡比例。流式细胞术检测T细胞表面FasL表达比例。ELISA法检测T细胞作用于靶细胞后IFN-γ与IL-2分泌水平。结果:成功将TCRVα12.2-Vβ7.1基因片段构建入嵌合型腺病毒载体,获得重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV。感染复数为100时,重组腺病毒有最高转染效率。感染3天后,TCRVα12Vβ7阳性细胞比例超过25%。特异性TCR基因转染有效促进T细胞杀伤AFP阳性肝癌细胞,特异性裂解率显著提高(P0.001)。特异性TCR基因转染有效促进T细胞诱导靶细胞凋亡(P0.001)。同时,T细胞表面FasL表达比例上升(P0.001)。TCR基因转染T细胞作用于AFP抗原阳性靶细胞后IFN-γ分泌显著提高(P0.001)。结论:重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV成功介导肿瘤特异性TCR基因转染T细胞。TCR基因转染可有效促进T细胞识别抗原阳性肿瘤细胞,并发挥抗肿瘤免疫效应。
【作者单位】： 广东药学院生命科学与生物制药学院;
【基金】：科技部“重大新药创制”科技重大专项(No.2009zx09103708) 国家自然科学基金(No.31100664,No.31300737) 东莞市科技计划项目(No.2011105102027)资助项目
【分类号】：R392.11
【正文快照】： 肿瘤细胞可以通过诱导免疫耐受、抗原调变、分泌免疫抑制因子等不同机制逃脱机体免疫监视。研究者发现,肿瘤细胞表达的大多数抗原并非具备特异性的新抗原,而是极其接近机体正常细胞表达的组织分化抗原[1,2]。由于胸腺的阴性选择清除了表达可识别自身抗原肽/MHC复合物的T细胞受

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本文编号：1203829