基于兔BMSCs预血管化细胞膜片的体外构建

发布时间：2017-11-26 19:29

  本文关键词：基于兔BMSCs预血管化细胞膜片的体外构建

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【摘要】：目的探讨构建预血管化细胞膜片新方法的可行性。方法取3周龄日本大耳白兔分离培养BMSCs,并在VEGF和bFGF作用下诱导其向血管内皮样细胞(endothelial like cells,ECs)分化(实验组),以未诱导细胞作为对照组,倒置显微镜下观察细胞形貌,并行血管性假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)及CD31免疫荧光染色观察。将第2代BMSCs以9×104个/cm2密度体外培养14 d形成未分化细胞膜片,将BMSCs诱导14 d获得的ECs以5×104个/cm2密度接种在细胞膜片上(A组)培养3、7、14 d,以单纯未分化的兔BMSCs膜片为B组,BMSCs诱导14 d获得的ECs单独培养为C组。倒置显微镜下观察血管网络形成,并行CD31免疫荧光染色及组织学观察。结果原代BMSCs呈长梭形;诱导分化后细胞形态发生改变,呈"铺路石"样。实验组vWF及CD31免疫荧光染色均呈阳性,而对照组均呈阴性。A组BMSCs诱导14 d后的ECs接种至未分化的BMSCs膜片上3、7、14 d后,细胞形态发生改变,镜下可见空泡样、网状结构形成;CD31免疫荧光检测显示了进行性管腔形成过程;HE染色显示了微血管管腔的形成。B、C组未观察到类似改变。结论 BMSCs在合适条件下可诱导形成ECs;将由BMSCs诱导分化形成的ECs接种至未分化BMSCs膜片上,可在体外形成具有血管网络结构的预血管化膜片,为工程化血管组织构建提供了新方法。
【作者单位】： 兰州大学口腔医学院口腔医院正畸科;兰州军区兰州总医院口腔颌面外科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81170938、81300860) 兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金(lzujbky-2013-173、lzujbky-2014-157) 全军医学科研“十二五”计划课题面上项目(CWS12J066)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 随着组织工程技术的发展,如何使工程化组织获得充足血供(即血管化)的问题已受到学者们的广泛关注[1-3]。大量研究通过复合内皮细胞与支架材料或支架材料负载促血管生长因子来构建血管(毛细血管),但由于支架材料潜在的免疫原性、不匹配的降解速率及较低的细胞利用率等缺点[4],

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 徐红珍;苏俭生;;组织工程骨的血管化研究进展[J];中华临床医师杂志(电子版);2010年04期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 马东洋;基于骨髓基质干细胞构建无外支架组织工程骨的实验研究[D];第四军医大学;2010年

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 何益群;董有海;;组织工程骨构建的研究进展[J];复旦学报(医学版);2013年06期

2 李富航;靳宇飞;毕龙;裴国献;;P物质在BMSCs来源的成骨细胞与内皮细胞体外联合培养中的作用[J];现代生物医学进展;2014年19期

3 陈亚莉;周诺;黄旋平;;细胞膜片技术及其在骨组织领域的应用进展[J];中国修复重建外科杂志;2012年09期

4 曹鑫;金格勒;杨毅;陈慧锦;殷剑;;重组人骨形态发生蛋白2调节人脂肪间充质干细胞表达血管内皮生长因子[J];中国组织工程研究;2013年14期

5 曹鑫;陈慧锦;崔正礼;金格勒;杨毅;王亚楠;肖伟;;重组人BMP-2调节VEGF表达的浓度和时间依赖性研究[J];中国修复重建外科杂志;2013年08期

6 赵基栋;苗宗宁;钱寒光;彭玮;司志平;;人胎盘间充质干细胞促进血管生成[J];中国组织工程研究;2013年23期

7 王纪文;李向东;魏国峰;;细胞共培养技术促进类前微血管结构发生[J];中国组织工程研究;2013年38期

8 赵天源;孙红;;骨组织工程支架材料及其血管化的研究进程[J];中国组织工程研究;2013年38期

9 冷冰;张鹏;任雨笙;梁春;曹智勇;吴宗贵;;脂联素对高糖刺激下内皮祖细胞的作用及其可能的作用机制[J];心脏杂志;2013年01期

10 王明海;洪洋;甘少磊;冯庆玲;吴俊国;钱光;耿雷;董有海;;血管化可注射性纳米组织工程骨对骨再生血管形成的影响[J];中华临床医师杂志(电子版);2013年13期

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 郑玉蓉;胶原/壳聚糖—明胶微球支架缓释三七皂甙Rg1促血管化研究[D];浙江大学;2014年

2 金晗;聚乙烯亚胺—藻酸盐/BMP-2基因复合物修饰的BMSCs细胞膜片促骨再生作用的研究[D];吉林大学;2014年

3 丁祥龙;经TiO_2纳米管修饰表面为微纳混合形貌的种植体其生物活性的体内外研究[D];南方医科大学;2014年

4 孙大炜;柠檬酸来源的成骨诱导支架促进大鼠颅骨骨缺损再生的研究[D];南方医科大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 赵俊华;网孔n-HA/PA66/成骨细胞/VEGF165组织工程骨修复骨缺损再血管化与成骨活性的研究[D];重庆医科大学;2012年

2 孙瑞;人工骨膜修复兔桡骨大段骨缺损的实验研究[D];兰州大学;2013年

3 郝晓娟;缺氧高糖预处理hUC-MSCs诱导分化为内皮样细胞的实验研究[D];河北医科大学;2013年

4 王巍巍;维尔迈2号治疗热毒型下肢动脉硬化闭塞症的疗效观察[D];黑龙江中医药大学;2013年

5 李绘楠;图案化纤维膜支架上血管相关细胞共培养的研究[D];西南交通大学;2013年

6 李受益;双因子诱导骨组织工程支架快速血管化的动物实验研究[D];天津医科大学;2013年

7 曹鑫;rhBMP-2调节人脂肪间充质干细胞VEGF表达的生物学规律及其机制的研究[D];新疆医科大学;2013年

8 李万里;去细胞犬喉支架的体内埋植实验[D];第四军医大学;2013年

9 王耀一;带蒂筋膜瓣促非细胞型组织工程化骨血管化及其成骨的组织学变化[D];河北北方学院;2012年

10 麻彩丽;柞蚕丝素作为VEGF165-Ang-1双基因共表达质粒传递载体的研究[D];苏州大学;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 张全彬;王黎明;徐燕;;重组腺病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因转染兔骨髓间充质干细胞[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年23期

2 金丹,陈滨,裴国献,王珂,唐光辉,魏宽海;筋膜瓣促组织工程骨再血管化及山羊长段骨缺损的修复[J];中华实验外科杂志;2005年03期

3 杨志明,樊征夫,解慧琪,秦廷武,彭文珍;组织工程化人工骨血管化研究[J];中华显微外科杂志;2002年02期

4 李建军;韩冬;孙鸿斌;王欢;徐莘香;;基因修饰的生物可降解人工骨修复骨缺损的血管化研究[J];中国修复重建外科杂志;2006年09期

5 梁峰;王韫芳;南雪;岳慧敏;徐迎新;施双双;李荣;裴雪涛;;体外诱导人骨髓间充质干细胞定向血管内皮细胞分化[J];中国医学科学院学报;2005年06期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 孙兆黎,孙秀兰,冯畹兰,张海玉,董春钰,赵福谭;UV-B照射的皮肤异种、同种、自体移植后存活及血管化研究[J];基础医学与临床;1997年03期

2 王健华,王玉兰;髂骨血管化带“窗口”移植修复下颌骨缺损的护理[J];护理学杂志;1999年01期

3 杨志明,樊征夫,解慧琪,秦廷武,彭文珍;组织工程化人工骨血管化研究[J];中华显微外科杂志;2002年02期

4 潘瑾,张益,毛驰,俞光岩;下颌骨缺损血管化腓骨瓣移植术后骨高度变化规律[J];中华口腔医学杂志;2004年06期

5 连青萍,归庆园;舌癌切除后血管化前臂皮瓣移植的手术配合[J];现代中西医结合杂志;2005年04期

6 张健;胡敏;韩志伟;张文怡;;成骨细胞与血管内皮细胞联合培养复合肌瓣预构血管化骨的初步研究[J];口腔医学研究;2006年06期

7 汪道新;张灵;范锟旣;杨维琦;李伟萍;张力勇;王峰;;人脐静脉血管内皮细胞移植对脱细胞猪真皮早期血管化的影响[J];临床和实验医学杂志;2007年04期

8 樊建中;孔祥泉;史河水;徐海波;刘定西;;羟基磷灰石眼眶植入物纤维血管化进程的MRI研究[J];临床放射学杂志;2007年06期

9 简月奎;田晓滨;李波;周焯家;赵伟峰;张一;杨震;王远政;;异种脱蛋白骨复合物修复大段骨缺损的血管化观察(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年23期

10 胡祥;余国荣;刘兴邦;陶圣祥;曾中华;刘春;;封闭负压引流技术对创面血管化的影响[J];医学新知杂志;2008年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 樊建中;孔祥泉;史河水;徐海波;刘定西;;兔眼眶植入羟基磷灰石义眼台血管化的MRI研究[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编（下册）[C];2006年

2 乔亮;陆树良;王志勇;韦俊;原博;金曙雯;花兰女;廖镇江;史济湘;;糖尿病大鼠深二度烫伤创面血管化研究[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年

3 郑杰;吴烨;黄文秀;牛刚;;血管化骨肌皮瓣修复上下颌骨缺损的临床研究[A];第五次全国口腔颌面—头颈肿瘤学术研讨会论文汇编[C];2006年

4 任天斌;宋莹;曹春红;王安;冯s，

本文编号：1230909