携带tPA信号肽序列HuZP3核心抗原核酸疫苗质粒的构建与体外瞬时表达

发布时间：2017-11-27 07:04

  本文关键词：携带tPA信号肽序列HuZP3核心抗原核酸疫苗质粒的构建与体外瞬时表达

  更多相关文章： HuZP核心抗原 核酸疫苗 瞬时表达 免疫原性

【摘要】：目的:构建含有组织型纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽的人卵透明带3(HuZP3)蛋白核心抗原核酸疫苗质粒并进行体外瞬时表达。方法:将HuZP3基因用PCR方法扩增并分别引入限制性内切酶酶切位点,然后克隆入pIRESIneo载体中获得核酸疫苗质粒,经筛选鉴定后,将上述核酸疫苗质粒及空载体质粒pIRESIneo分别用脂质体瞬时转染CHO细胞,应用免疫印迹法检测核心抗原在体外CHO细胞中的表达,并将其免疫实验小鼠,以酶联免疫吸附法验证其免疫原性。结果:成功构建以pIRESIneo为载体的含tPA信号肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗质粒,体外瞬时表达证实含tPA信号肽的HuZP3核心抗原在CHO细胞胞内和胞外均能表达,含tPA信号肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗质粒的核心抗原表达水平较高,核酸疫苗质粒具有很好的免疫原性。结论:以pIRESIneo为载体的含tPA信号肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗能够将细胞内的HuZP3核心抗原分泌到细胞外,构建的核酸疫苗质粒pIRES1-ZP3/tPA具有很好的免疫原性,为进一步研究其免疫原性奠定了基础。
【作者单位】： 长春中医药大学基础医学院;吉林大学第四医院;吉林省人民医院;军事医学科学院军事兽医研究所;
【基金】：吉林省科技厅计划发展项目(20140204001YY)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 理想的透明带疫苗应该能诱发足够的抗体反应而不激活病理性的T细胞反应,即能够诱发足够滴度的抗透明带抗体并产生明显的避孕效果而又不至于引起卵巢自身免疫疾病,因此制备只含有ZP3 B细胞表位而不带人T细胞表位的肽段,对制备透明带疫苗至关重要。本实验按编码23~360肽段的人ZP

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 ;Regulating Effects of Novel CpG Chitosan-nanoparticles on Immune Responses of Mice to Porcine Paratyphoid Vaccines[J];Biomedical and Environmental Sciences;2006年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 师瑞;吴开春;吴道澄;樊代明;;新型胃癌靶向纳米疫苗的制备及其生物学活性的研究[J];中华消化杂志;2007年08期

2 李斌;苏乾莲;赵武;秦毅斌;梁家幸;肖爱欢;卢冰霞;李莹莹;何颖;段群棚;姜佳佳;梁保忠;;三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建[J];中国兽医科学;2013年10期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 王凤娟;JEV多表位基因重组痘苗病毒安卡拉株（rMVA-mep）及其免疫效果评价[D];南京农业大学;2011年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王陆宝;冉多良;王红霞;孟庆文;徐佳;吴东来;;SARS-Co V S基因重组质粒的构建与瞬时表达[J];新疆农业大学学报;2005年04期

2 陶俊;李丹;邓宁;王宏;龚义平;向军俭;;抗bFGF人源性抗体的瞬时表达、纯化及鉴定[J];中国免疫学杂志;2010年10期

3 孙梦梅;靳彦文;李平;曹诚;张部昌;;新型抗uPAR人源化抗体的表达和活性检测[J];军事医学;2011年04期

4 李云华;王公金;;Ser-125突变型人白细胞介素-2在家兔乳腺中的瞬时表达[J];江苏农业学报;2005年04期

5 张梦寒,诸葛洪祥,陈明中,许菊;汉滩病毒76-118株核蛋白部分基因片段的克隆、表达和抗原活性测定[J];现代免疫学;2005年04期

6 赵群力;闵娟;周怀瑜;古钦民;丛华;李瑛;;新型基因佐剂SPreS2真核表达载体的构建及其瞬时表达[J];山东大学学报(医学版);2010年09期

7 杨晶;郭咏昕;任素平;周婷婷;李海燕;李校X;;利用红花瞬时表达aFGF-GFP融合基因的研究[J];中国中药杂志;2011年03期

8 胡玲玲;徐耀瑜;陈永井;马泓冰;程钢;刘玉华;王艳茹;孙杰;陈明心;邱玉华;;抗人CD86人-鼠嵌合抗体的构建及在CHO细胞的表达[J];现代免疫学;2008年02期

9 陶俊;向军俭;王宏;龚义平;邓宁;;人源性抗体在HEK293T细胞中瞬时表达条件的优化[J];生物技术通报;2010年11期

10 郭焱,金宁一,郭巍,王尔孚,张蕾;人类免疫缺陷病毒B亚型代表株候选疫苗的研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2002年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 赵阳;柳子星;王颖;张惠珍;王树军;葛海良;;大鼠IL—10真核表达载体在软骨细胞中的瞬时表达[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

2 严杰;;医学细菌学研究热点与发展趋势[A];浙江省医学会医学微生物与免疫学及医学病毒学学术年会论文汇编[C];2009年

3 王海红;曲忠森;张迎春;王建枝;;DVL-1 cDNA重组质粒在N2a细胞中的瞬时表达[A];湖北省暨武汉市病理生理学会第十二届学术年会论文汇编[C];2004年

4 张秉强;黄英;何茂锐;唐霓;吴莹;张君;陈维贤;黄爱龙;Tong-Chuan He;;不同靶区RNA干扰抑制HBV复制与表达[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年

5 马正海;周璨林;王艳萍;热西旦;余勐;张富春;;优化HPV16L1基因密码子以增强DNA疫苗免疫效果[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年

6 王艳萍;马正海;热西旦;周璨林;余勐;张富春;;蛋白分泌溶解片段与HPV16 L1融合增强DNA疫苗免疫效果[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年

7 吴丽娟;陈伟;康格非;蒋建新;朱佩芳;;锌指蛋白A20基因沉默载体研究与初步应用[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年

8 吴晓娟;冷梅;赵大鹏;崔颖杰;张岩;汪春义;戚凤春;郭新;付学奇;;带有IL-2基因佐剂的乙肝病毒DNA疫苗构建及其免疫效果的观察[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年

9 张小荣;焦新安;潘志明;张晓明;刘秀梵;;以减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的构建及其对小鼠的免疫原性[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年

10 吴金明;黄智铭;吴建胜;林向飞;陈向荣;黄庆科;;乙型肝炎病毒L02细胞转染模型的建立与鉴定[A];2005年浙江省消化系疾病学术会议论文汇编[C];2005年

中国博士学位论文全文数据库 前5条

1 丁一;tPA乳腺特异性表达载体的构建及其瞬时表达[D];郑州大学;2003年

2 唐丽;新细胞粘附分子LSECtin识别活化T细胞的功能及其分子机制[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

3 刘定燮;SV40载体/COS7细胞稳定表达系统的建立与改进[D];中国人民解放军军事医学科学院;2002年

4 廖国阳;HBV囊膜蛋白与HCV核心蛋白基因联合免疫研究[D];中国协和医科大学;2000年

5 陈涛涌;来源于人树突状细胞的新型癌基因样小G蛋白RabJ的生物学功能研究[D];第二军医大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 陈宇;在烟草中瞬时表达人角质细胞生长因子-1（KGF1）[D];吉林农业大学;2011年

2 宋向凤;人生长激素基因在小鼠体内的表达及对免疫功能的影响[D];新乡医学院;2003年

3 袁云;CEA乳腺特异性表达载体的构建及其瞬时表达[D];郑州大学;2006年

4 宋晓妍;人生长激素真核表达载体的构建及其瞬时表达[D];郑州大学;2006年

5 叶建新;人OSM基因的克隆、表达及功能研究[D];苏州大学;2005年

6 袁小松;增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因在日本血吸虫体内及原代培养细胞内的异源表达[D];安徽医科大学;2006年

7 陈琳;GFP-HCMV IE1融合蛋白对巨噬细胞分泌功能与凋亡的影响[D];南华大学;2008年

8 徐耀瑜;CD80鼠—人嵌合抗体的构建、表达及生物学功能的初步研究[D];苏州大学;2008年

9 石连;烟草表达粉尘螨1类变应原及其免疫治疗研究[D];安徽理工大学;2012年

10 王春梅;新型人钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白hCaMKIINα的克隆及其生物学功能研究[D];第二军医大学;2004年

，

本文编号：1230981