人凝血因子IX的线性B细胞表位预测及鉴定

发布时间：2017-11-27 11:00

  本文关键词：人凝血因子IX的线性B细胞表位预测及鉴定

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【摘要】：为预测并鉴定人凝血因子IX(FIX)的线性B细胞表位.通过IEDB数据库及Discovery Studio软件预测FIX的B表位和白喉毒素T结构域(DTT)的B表位,用所预测的FIX的B表位替换某预测的DTT的B表位形成DTT-表位融合蛋白.通过基因工程技术制备各重组蛋白,并免疫小鼠,通过ELISA和Western-blot检测抗血清效价和特异性,通过等温量热滴定技术(ITC)测定抗体的亲和力.预测到4个FIX的B表位.用重组蛋白FIX-2-DTT免疫的小鼠产生了识别完整FIX的抗体,该抗体具有良好的特异性,其结合常数KD为106 M-1.表明FIX-2(306 NAAINKY312)是FIX的B表位,用重组蛋白FIX-2-DTT免疫小鼠能够产生特异性识别FIX且亲和力温和的抗体.
【作者单位】： 微生物代谢国家重点实验室 生命科学技术学院上海交通大学;
【基金】：国家科技重大专项(重大新药创制专项)资助(2014ZX09101043)
【分类号】：R392
【正文快照】： 引言凝血因子IX(Human coagulation factor IX,FIX)是人体凝血系统中一个非常重要的凝血因子,其缺乏会导致血友病B.该病的治疗主要依赖于终身注射FIX制剂[1,2].FIX制剂主要包括血源FIX和重组FIX,它们都需要从相应的混合物中进行分离纯化.传统的FIX纯化方法包括磷酸钙吸附法、，

本文编号：1231592