产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位可有效诱导和增强对肠道病毒71型的黏膜免疫应答

发布时间：2017-12-02 19:13

  本文关键词：产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位可有效诱导和增强对肠道病毒71型的黏膜免疫应答

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【摘要】：目的研究产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的免疫原性。评价肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VP1联合LTB的鼻腔免疫效果。方法构建重组质粒pET32a-LTB,表达的6×His-LTB融合蛋白用Ni2+-NTA树脂纯化后免疫新西兰大白兔制备抗血清,ELISA检测抗血清效价。用纯化的EV71 VP1、LTB联合EV71 VP1、生理盐水分别经鼻腔免疫BALB/c小鼠,收集血清、肺和小肠黏膜冲洗液,采用间接ELISA检测IgG和分泌性IgA(sIgA)。结果已成功构建重组质粒pET32a-LTB。表达的6×His-LTB融合蛋白主要以包涵体形式表达,相对分子质量(Mr)约为30 000,免疫兔所制备的抗血清效价为1∶125 000。EV71 VP1联合LTB组的小鼠特异性IgG和sIgA水平较EV71 VP1单独免疫组和对照组有明显增高。结论在E.coli BL21(DE3)中成功表达了6×His-LTB融合蛋白,纯化的融合蛋白具有良好的免疫活性和佐剂活性。通过滴鼻免疫,LTB可有效增强特异性血清抗体反应,诱导黏膜免疫应答。
【作者单位】： 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室;重庆医科大学分子医学肿瘤研究中心;
【基金】：国家自然科学基金(30972585)
【分类号】：R378
【正文快照】： 在发展中国家,引起婴幼儿和旅行者腹泻的主要病原菌为人源性产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenicEscherichia coli,ETEC),每年因ETEC腹泻而夭折的儿童多达数十万[1-3]。ETEC分泌的毒性蛋白有2种:耐热肠毒素(heat-stable entemtoxin,ST)和不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,L

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 姜柯安;贺志良;宋方洲;马永平;;产肠毒素大肠杆菌K88菌毛蛋白与大肠杆菌不耐热肠毒素b亚单位的原核表达及其鼻腔免疫效果[J];中国生物制品学杂志;2012年09期

2 贺志良;姜柯安;宋方洲;马永平;;产肠毒素大肠杆菌987P菌毛蛋白FasA亚单位的原核表达及其免疫原性[J];中国生物制品学杂志;2012年09期

3 周建嫦,张建中,何利华,徐采朴,张茂俊,盛涛,郭浩岩,肖文平;幽门螺杆菌cagA克隆表达[J];微生物学免疫学进展;2002年04期

4 郑继平;肠毒素大肠杆菌疫苗研究进展[J];微生物学免疫学进展;2003年01期

5 李国平,杨恬;粘膜免疫系统的研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2001年06期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 胡建军;陈创夫;祝建波;;K88菌毛基因的克隆及ST表位序列在菌毛基因上的融合[J];安徽农业科学;2008年21期

2 王新;刘金玲;索占伟;穆祥;韦旭斌;谭建华;;大肠杆菌病与微血管之间的密切关系[J];中国畜牧兽医;2006年06期

3 王R，

本文编号：1245976