结核分枝杆菌PZase-GST融合蛋白表达与鉴定
本文关键词:结核分枝杆菌PZase-GST融合蛋白表达与鉴定
【摘要】:目的构建及鉴定含有GST标签的结核分枝杆菌pncA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中高效表达融合蛋白。方法 PCR扩增结核杆菌pncA基因,并构建到pGEX4T-1上。重组质粒经测序鉴定后进行诱导表达。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析重组蛋白。结果与预期大小相似,PCR扩增出大约600 bp的pncA基因,并且吡嗪酰胺酶(PZase)在诱导后得以高效表达。结论构建了质粒载体pGEX4T-1-pncA,并经诱导后高效表达了PZase融合蛋白,为进一步研究吡嗪酰胺(PZA)耐药性奠定了基础。
【作者单位】: 河南省疾病预防控制中心;
【分类号】:R378.911
【正文快照】: 据WHO统计[1],全世界每年因结核病死亡人数超过200万,新发病例超过880万,中国现有结核病人约600万,新发病例113万/年,死亡人数25万/年,成为结核病高负担地区。作为空气传播的传染病,结核病人的治疗成为控制结核病的关键,异烟肼、利福平、吡嗪酰胺和乙胺丁醇是WHO推荐治疗结核
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 姜英;彭俊平;杨帆;余黎;王玉琳;金奇;;结核分枝杆菌耐吡嗪酰胺分子机制研究[J];微生物学免疫学进展;2007年01期
2 吴雪琼,张俊仙,钟敏,俞伟,丁北川,张军芝,贾树林;结核分支杆菌耐吡嗪酰胺分离株pncA基因突变的研究[J];中华结核和呼吸杂志;2000年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙冰梅;于红;张克佳;;青岛地区结核分支杆菌吡嗪酰胺耐药基因pncA的检测[J];青岛大学医学院学报;2007年02期
2 徐龙强;于红;孙冰梅;周本杰;张文卿;;结核分枝杆菌耐砒嗪酰胺pncA基因突变的检测[J];青岛大学医学院学报;2009年05期
3 王巍,姜平,李洪敏,冯柏,吴雪琼,陈东进,王安生,叶一秀,王仲元,刘金伟,陈红兵,林明贵,王金河,李素梅;结核分支杆菌耐药基因检测对获得性耐药性的研究[J];标记免疫分析与临床;2004年04期
4 徐龙强;于红;;结核分支杆菌耐药的分子机制研究进展[J];检验医学与临床;2009年11期
5 李洪敏;刘翠华;陈红兵;刘琳;苏锐;刘景阳;王立平;;初治肺结核患者中西医结合治疗的疗效分析[J];临床肺科杂志;2011年08期
6 李洪敏;于建敏;姜平;张广宇;刘翠华;梁建琴;;分析老年矽肺结核病的耐药水平与临床治疗[J];临床肺科杂志;2012年06期
7 刘朋冲;阎锡新;李志惠;赵杰;;基因芯片技术检测方法对耐多药肺结核治疗的指导价值研究[J];临床肺科杂志;2014年04期
8 崔宜庆;杜中华;王静;吴中菲;;耐药性结核分枝杆菌研究近况[J];现代生物医学进展;2010年22期
9 孙冰梅;朱婕;高静;;耐多药结核分支杆菌临床分离株吡嗪酰胺耐药基因pncA的检测[J];山西医药杂志;2007年07期
10 张耘;耐多药结核病的再认识[J];实用临床医药杂志;2005年05期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 王庆忠;结核分枝杆菌利福平耐药相关基因突变检测及Rv2629基因191A/C突变功能初步研究[D];复旦大学;2007年
2 彭超;结核分枝杆菌Mtb9.9家族蛋白免疫功能的研究[D];复旦大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 谭景尹;PCR—膜芯片~(?)技术检测结核杆菌耐药基因突变的应用研究[D];广西医科大学;2011年
2 孙冰梅;青岛地区结核分枝杆菌临床分离株吡嗪酰胺耐药基因pncA的检测[D];青岛大学;2004年
3 崔艳丽;烟台地区结核分支杆菌rpoB、KatG和rpsL三种耐药基因的检测与耐药相关性的研究[D];青岛大学;2006年
4 周清;黄芩苷的抗结核分枝杆菌作用机制的研究[D];天津医科大学;2012年
5 钟春蕾;结核分枝杆菌rpoB、katG基因突变位点的克隆及其应用[D];遵义医学院;2012年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 金韬;叶松;;结核分枝杆菌耐药性分子机制研究现状[J];医学动物防制;2010年10期
2 王和;罗振华;徐艳;梁菁苹;;细胞壁缺陷结核分枝杆菌耐药性的基因研究[J];中国抗生素杂志;2007年10期
3 弓显凤;田芮华;方风君;李秀花;赵琳;张熙yN;任郭侠;毋永锋;;结核分枝杆菌耐多药现状调查分析[J];中华医院感染学杂志;2010年22期
4 李红霞;陈建平;曾林子;刘刚;姚卫;杨筠;刘杨椅;王涛;田玉;;重组结核分枝杆菌ESAT6-PPE68融合蛋白的制备[J];南方医科大学学报;2007年02期
5 闫立成;刘茜;李世明;幺作义;冯福民;;唐山地区结核分枝杆菌的氨基甙类抗生素耐药情况分析[J];中国煤炭工业医学杂志;2008年08期
6 张薇;王丽梅;柏银兰;康健;何俊杰;徐志凯;;结核分枝杆菌Rv2626c基因的表达、纯化和鉴定[J];科学技术与工程;2009年08期
7 梅建华;雷永良;王晓光;陈秀英;;结核分枝杆菌异烟肼耐药基因KatG分析[J];中国卫生检验杂志;2010年06期
8 杨本付,徐飚,蒋伟利,周佩源,姜庆五;结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究[J];中国公共卫生;2005年08期
9 梁菁苹;王和;;结核分枝杆菌稳定L型利福平耐药性基因的研究[J];贵州医药;2006年06期
10 吴森林;范兴丽;;rpoB基因点突变与结核分枝杆菌对利福平耐药相关性的研究[J];中国人兽共患病学报;2006年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈曦;张宗德;刘忠泉;贾红彦;邢爱英;古书香;;结核分枝杆菌rv3873、rv3879c基因原核表达载体的构建和表达[A];中华医学会结核病学分会2006年学术会议论文汇编[C];2006年
2 温见翔;吴少庭;陈群;秦莉;袁仕善;雷明军;潘晖榕;林绮萍;张仁利;高世同;黄达娜;;结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的表达与纯化[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年
3 徐蕾;王瑜伟;王爽;萜儒修;朱道银;;结核分枝杆菌复活促进因子D在原核表达载体中的表达与纯化[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
4 陈曦;古淑香;贾红彦;李自慧;郑小静;刘忠泉;邢爱英;杜博平;张继增;张宗德;;结核分枝杆菌特异性分泌蛋白原核表达和纯化[A];中华医学会2008年全国结核病学术会议论文汇编[C];2008年
5 张月新;辛毅;马郁芳;;结核分枝杆菌RmlB的表达、纯化及酶促反应动力学研究[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年
6 刘焰;刘胜武;谈蓉;马立新;刘君炎;;结核分枝杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子重组腺表达载体的构建[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
7 周培富;谢建平;;结核分枝杆菌双组份调控系统概况[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
8 赵全菊;谢建平;;结核分枝杆菌蛋白酶毒力因子的分子遗传研究[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年
9 冯永红;杨鑫;丁元生;秦莲花;杨华;郑瑞娟;王洁;胡忠义;;结核分枝杆菌CE抗原复合物对人巨噬细胞TNF-α产生及抗原提呈相关功能分子表达的影响[A];全国复治肺结核诊断与治疗进展研讨会论文汇编[C];2007年
10 朱明利;;分枝杆菌L型及其检测方法研究进展[A];2007年浙江省医学病毒学、医学微生物与免疫学学术年会论文汇编[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 陈青;让结核菌三天内原形毕露[N];文汇报;2009年
2 庄愉;新型抗结核疫苗的开发研究[N];中国医药报;2002年
3 郝成涛 何玉玺;流感病毒是否具有抗药性,一测便知晓[N];科技日报;2009年
4 本报记者 王小龙;“见义勇为”的细菌“英雄”[N];科技日报;2010年
5 本报记者 李颖;我拿什么对付你 细菌耐药?[N];科技日报;2011年
6 记者 李荔;致命病菌很特殊[N];北京科技报;2011年
7 张旭;惠氏公布肺炎球菌疾病研究最新进展[N];中国医药报;2009年
8 上海证券 彭蕴亮;“超级细菌”或激活医疗产业链[N];中国证券报;2010年
9 医文;赛诺菲—巴斯德艰难梭菌疫苗进入临床试验新阶段[N];中国医药报;2009年
10 孙国根;闻玉梅院士解读“人体细菌群落分布图”[N];中国医药报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 尹春煜;中国HIV-1主要结构基因的序列变异性以及耐药相关性突变分析[D];复旦大学;2005年
2 贾健辉;白念珠菌IPF7817基因的生物学功能研究[D];沈阳药科大学;2007年
3 徐广宇;基于生物信息学的结核分枝杆菌分子流行病学调查及诊断靶标簇系统平台的建立[D];吉林大学;2013年
4 董海燕;中国13省市结核分枝杆菌基因多态性分析[D];中国疾病预防控制中心;2011年
5 赵明才;结核分枝杆菌喹诺酮耐药基因功能研究[D];四川大学;2005年
6 薛莹;结核分枝杆菌Rpf样蛋白生物学及免疫学活性的研究[D];第四军医大学;2005年
7 刘立国;结核分枝杆菌H37Rv ORF组学研究[D];吉林大学;2008年
8 王庆忠;结核分枝杆菌利福平耐药相关基因突变检测及Rv2629基因191A/C突变功能初步研究[D];复旦大学;2007年
9 乐军;耐药结核分枝杆菌的多维分析[D];复旦大学;2003年
10 屈野;结核分枝杆菌ESX-1分泌蛋白调控巨噬细胞功能的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 姚炜;结核分枝杆菌热休克蛋白Hsp60编码基因的克隆与原核表达[D];华中科技大学;2006年
2 申峻松;结核分枝杆菌lhp基因的原核表达及其产物的单克隆抗体研制[D];扬州大学;2008年
3 王霞芳;IFN-γ增强BALB/c小鼠对结核分枝杆菌感染的抵抗力[D];苏州大学;2002年
4 宇岩;中国结核分枝杆菌临床分离菌株利福平耐药基因rpoB突变特征的初步研究[D];大连医科大学;2007年
5 王琳;结核分枝杆菌ClpX和ClpP2蛋白酶的克隆表达及其性质研究[D];西南大学;2010年
6 佘茜;结核分枝杆菌PPE68蛋白的表达及初步应用[D];重庆医科大学;2011年
7 宋宇;结核分枝杆菌MurA的优化表达及功能分析[D];大连医科大学;2010年
8 郝方;结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶基因的克隆表达及酶学性质研究[D];宁夏医学院;2005年
9 黄春;新疆地区结核分枝杆菌临床分离株致病相关基因的筛选[D];石河子大学;2007年
10 王丽梅;分泌表达结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的重组BCG的构建、表达及免疫学特性的初步研究[D];第四军医大学;2004年
,本文编号:1246831
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/binglixuelunwen/1246831.html