体外血脑屏障模型的建立及功能测定

发布时间：2017-12-09 00:05

  本文关键词：体外血脑屏障模型的建立及功能测定

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【摘要】：目的利用大鼠原代微血管内皮细胞及星形胶质细胞建立体外血脑屏障模型,并通过跨内皮细胞电阻(Trans-epithelium electrical resistant,TEER)方法对血脑屏障模型进行功能测定。方法原代分离纯化SD大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞,用免疫荧光检测内皮细胞标志物VWF,紧密连接蛋白ZO-1,星形胶质细胞标志物GFAP;用微血管内皮细胞和星形胶质细胞在Transwell小室上建立体外血脑屏障模型,观察TEER值的动态变化。结果原代的微血管内皮细胞培养至融合后具有典型的梭形"铺路石"样外观,VWF鉴定细胞纯度达到95%以上,ZO-1免疫荧光鉴定证实细胞间形成紧密连接;原代培养的星形胶质细胞呈现具有多个突起的典型形态,GFAP鉴定细胞纯度达到95%以上;在第10 d,单独微血管内皮细胞血脑屏障模型的TEER值为(42±1.41)Ωcm2,内皮细胞和星形胶质细胞共培养血脑屏障模型的TEER值为(65±1.42)Ωcm2。结论建立了体外血脑屏障模型,通过TEER值测定证明共培养使模型更加完整,更加接近在体血脑屏障模型的特性。
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科;
【基金】：国家自然科学基金项目(81000521,81030021)
【分类号】：R-332;R741
【正文快照】： 血脑屏障由沿着中枢神经系统微血管排列的内皮细胞行成,在维持神经细胞信号通讯所需的精密调节的微环境中起着重要的作用[1]。血脑屏障的主要作用有4条:(1)维持中枢神经系统稳态;(2)将脑组织与血流分开,保护脑组织免受血流中细胞成分的影响;(3)通过特定的转运系统持续提供养分

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本文编号：1268323