亲磷脂酸磷脂酶A1基因沉默降低MIN6细胞胰岛素分泌水平

发布时间：2017-12-11 21:33

  本文关键词：亲磷脂酸磷脂酶A1基因沉默降低MIN6细胞胰岛素分泌水平

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【摘要】：目的:探讨亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因沉默对小鼠分泌胰岛素细胞MIN6分泌功能的影响。方法:根据GenBank中小鼠PA-PLA1基因mRNA序列构建siRNA表达载体(pGPU6-PA-PLA1)并转染MIN6,实时荧光定量PCR和Western blot筛选有效干扰载体。将获得的有效干扰载体转染MIN6细胞48 h后进行葡萄糖刺激实验,检测其胰岛素分泌的变化。结果:酶切及测序证实成功构建了4个靶向PA-PLA1的siRNA表达载体。实时荧光定量PCR和Western blot分析显示siRNA表达载体pGPU6-PA-PLA1-1885具有较高的干扰效率,其转染的MIN6细胞PA-PLA1 mRNA水平降至对照组的46.3%,PA-PLA1蛋白水平降至对照组的33.9%,同时胰岛素分泌水平降至对照组的65.0%(P0.05)。结论:PA-PLA1基因沉默可降低MIN6的胰岛素分泌水平。
【作者单位】： 桂林医学院 医药生物技术重点实验室及生物化学与分子生物学教研室;
【基金】：国家自然科学基金(编号:30860094) 广西自然科学基金(编号:2013GXNSFAA019233)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 亲磷脂酸磷脂酶A1(phosphatidic acid-preferring phospholipase A1,PA-PLA1)在细胞内水解磷脂酸(phosphatidic acid,PA)的sn-1脂酰基生成sn-2-溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)。PA和LPA不仅参与内分泌细胞的分泌过程[1-2],而且作为细胞内脂类信号分子参与多种细胞过程

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本文编号：1280037