Notch信号通路阻断剂对人脐带间充质干细胞软骨分化的影响

发布时间：2017-12-16 01:07

  本文关键词：Notch信号通路阻断剂对人脐带间充质干细胞软骨分化的影响

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【摘要】：背景:Notch信号通路作为一条在细胞增殖和分化过程中起重要作用的信号通路,目前它在人脐带间充质干细胞在体外向软骨细胞诱导分化过程中的作用仍然未知。目的:首次探讨Notch信号通路特异性阻断剂2,4-二氨基-5-苯噻唑(DAPT)对人脐带间充质干细胞向软骨细胞诱导分化的影响。方法:从人脐带中分离获得间充质干细胞,体外向软骨细胞诱导分化。实验分4组:①无诱导组换成含体积分数5%胎牛血清和1%双抗的DMEM高糖培养基培养。②单纯诱导组换成终浓度为6.25 mg/L胰岛素、6.25 mg/L转铁蛋白、10μg/L转化生长因子β1、0.1μmol/L地塞米松、50 mg/L维生素C、体积分数5%胎牛血清和1%双抗的软骨诱导培养基培养。③二甲基亚砜组在软骨诱导培养基中加入终浓度为0.1%的二甲基亚砜培养。④2,4-二氨基-5-苯噻唑组在软骨诱导培养基中加入终浓度为5μmol/L的2,4-二氨基-5-苯噻唑(溶于二甲基亚砜)培养,二甲基亚砜终浓度为0.1%。结果与结论:诱导人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化后,细胞形态由长梭形变为多边形,且甲苯胺蓝染色和免疫荧光染色均呈现阳性;软骨诱导分化后Jag-1、PS-1、Notch-1、Hes-1的基因表达均明显下降(P0.01);添加2,4-二氨基-5-苯噻唑后,与单纯诱导组相比,人脐带间充质干细胞中Jag-1、PS-1、Hes-1(P0.01)和Notch-1(P0.05)的基因表达显著降低;蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白含量均降低(P0.01);蛋白聚糖的基因表达显著降低(P0.01),Ⅱ型胶原蛋白的基因表达也出现一定程度的下降。提示Notch信号存在于人脐带间充质干细胞中,诱导人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化后,这种信号强度迅速减弱;2,4-二氨基-5-苯噻唑可能通过Jag-1-Notch-1-Hes-1途径抑制人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化。
【作者单位】： 暨南大学医学院生物化学系;暨南大学理工学院力学和土木工程系;
【基金】：广东省自然科学基金资助项目(9151008901000050) 暨南大学大学生创新创业训练计划(Cx12200)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction关节软骨组织由软骨细胞和细胞外基质组成,蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白是关节软骨组织细胞外基质的主要成分,在体内起着重要作用[1-2]。关节缺损及骨关节炎等原因造成的关节软骨损伤和退化是骨科常见的难题,给患者带来极大的痛苦和经济负担。虽然自体软骨细胞移

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 孙安科,裴国献;软骨组织工程种子细胞的来源、培养和评价[J];国外医学.生物医学工程分册;2003年04期

2 罗二梅;宇丽;张家文;柳菁;;还原型谷胱甘肽对人脐带间充质干细胞成软骨诱导的影响[J];中国生物工程杂志;2013年03期

3 洪奇华;Notch信号途径及其调控[J];细胞生物学杂志;2004年04期

4 徐若男;施明;王福生;;人脐带间充质干细胞的特征及其临床应用前景[J];中国免疫学杂志;2010年01期

5 靳小兵;;软骨组织工程研究新进展[J];中国修复重建外科杂志;2011年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 金磊;福军亮;张政;王嗣予;徐若男;吕吉云;张纪元;王福生;;脐带间充质干细胞治疗HIV感染的安全性评价[J];传染病信息;2010年06期

2 付亚娟;叶枫;吕卫国;谢幸;;Notch信号通路的研究现状[J];医学分子生物学杂志;2007年05期

3 刘纪红;张倩;郭晴;;基于SIFT的软骨切片电镜图像拼接算法[J];东北大学学报(自然科学版);2014年06期

4 李江涛;赵和泰;张效北;韩笑元;李伟;覃雪燕;李丁;何龙;;间充质干细胞治疗慢性重症乙型肝炎临床分析[J];中外医疗;2012年03期

5 熊熠;林月秋;申财芳;;软骨组织工程种子细胞的选择[J];西南军医;2011年06期

6 尹成玉;崔勇;王斌;刘韬;董辉;高杰;高旭超;;视神经损伤治疗的进展[J];科技信息;2011年31期

7 王民增;刘峦松;李东魁;李建明;;Notch1、Notch2表达与移行细胞肿瘤恶变及发展关系的研究[J];现代泌尿外科杂志;2013年01期

8 张玉琳;于纪棉;曾斌;王静文;倪晶晶;;人脐带间充质干细胞最适宜培养条件研究[J];中国民族民间医药;2013年11期

9 张亚倩;梁军;田沁森;丁玉芳;余道海;;人脐带间充质干细胞分离培养方法的优化[J];牡丹江医学院学报;2013年05期

10 罗二梅;张家文;胡笑轲;唐明乔;宇丽;;共培养人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)和兔关节软骨细胞诱导hUC-MSCs分化成软骨细胞[J];基础医学与临床;2014年01期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 耿涛;杨福合;邢秀梅;李春义;;Notch信号通路在体外培养的鹿茸干细胞中的表达[A];2010中国鹿业进展[C];2010年

2 周凌云;李荣亨;;Notch和Wnt信号通路与骨关节炎[A];全国第十一届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2013年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 陈剑锋;表达载体介导的Notch2基因沉默抑制人骨肉瘤侵袭和转移的实验研究[D];华中科技大学;2011年

2 黄丹琳;人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠梗阻性肾间质纤维化的实验研究[D];中南大学;2011年

3 李军锋;泛素—蛋白酶体途径参与小鼠SPEN家族MINT蛋白转录调控作用的研究[D];第四军医大学;2006年

4 于春泳;NOTCH-1信号通路对脑胶质瘤干细胞增殖与分化调控作用的实验研究[D];第三军医大学;2008年

5 马健会;mTOR信号通路通过Notch信号调节细胞分化[D];中国协和医科大学;2009年

6 于雷;癌基因c-Myc、Kras及Notch2与辐射诱发胸腺淋巴瘤的相关研究[D];吉林大学;2010年

7 秦炜炜;模拟失重条件下microRNA-494抑制成骨细胞分化作用机制的研究[D];第四军医大学;2010年

8 赵磊;人脐带间充质干细胞生物学特性及脉冲电磁场促进其成骨分化研究[D];吉林大学;2010年

9 杜红阳;地黄多糖通过Notch信号通路诱导BMSCs分化为神经样细胞作用的实验研究[D];辽宁中医药大学;2012年

10 孙志涛;鹿茸归经靶向调控骨关节炎TGF-β/Smads信号通路机制研究[D];广州中医药大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 周志刚;人脐带间充质干细胞定向诱导分化成类神经元的实验研究[D];暨南大学;2011年

2 孙丽哲;Notch在中国卤虫不同发育时期的表达模式[D];辽宁师范大学;2011年

3 习旭涛;人脐带间充质干细胞初始接种密度对成骨诱导分化影响的初步研究[D];中南大学;2011年

4 江祺川;BMP-2与b-FGF对大鼠关节软骨细胞体外增殖和分化的作用[D];辽宁医学院;2011年

5 尹成玉;间充质干细胞治疗视神经损伤的临床观察[D];青岛大学;2011年

6 苏新;b-FGF、IGF-Ⅰ对体外培养的兔关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响[D];南京医科大学;2006年

7 朱海强;PHA生物材料支架对脐带间充质干细胞向成骨分化的影响[D];汕头大学;2010年

8 韩爽;自体脂肪干细胞复合人脐带Wharton胶支架修复兔膝关节软骨缺损的实验研究[D];山西医科大学;2012年

9 孙娟;肝硬化患者生命质量调查及干细胞治疗对其生命质量的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年

10 王凯;离体神经元损伤后Homer1a与Notch信号的作用及关系研究[D];第四军医大学;2012年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 柳菁;宇丽;许超;罗二梅;;长期培养人脐带间充质干细胞分化能力改变的研究[J];中国生物工程杂志;2012年02期

2 李振华;赵文海;周秋丽;;鹿茸多肽对抗骨关节炎软骨细胞氧化损伤作用的实验研究[J];中国骨伤;2011年03期

3 王健,夏万尧,崔磊,曹谊林,商庆新;同种异体组织工程化软骨组织的免疫学差异[J];中华创伤杂志;2001年07期

4 孙安科,陈文弦,崔鹏程,罗家胜;同种异体工程化软骨的构建和修复甲状软骨缺损的实验研究[J];中华耳鼻咽喉科杂志;2001年04期

5 焦岩涛,王大章,韩文利,胡静;bFGF、IGF-Ⅰ及TGF-β_1对人髁突软骨细胞增殖的影响[J];中华口腔医学杂志;2000年05期

6 ;Human umbilical cord Wharton's Jelly-derived mesenchymal stem cells differentiation into nerve-like cells[J];Chinese Medical Journal;2005年23期

7 刘方军 ,曹谊林 ,商庆新 ,崔磊 ,刘伟;真核表达载体pcDNA3.1-h转化生长因子-β1的构建[J];中华实验外科杂志;2002年03期

8 夏万尧,曹谊林,商庆新,刘彦春,王倬,崔磊,王健;同种异体组织工程化软骨组织形成的初步研究[J];中华整形外科杂志;2000年05期

9 夏万尧 ,商庆新 ,徐蓉 ,曹谊林 ,崔磊 ,丁小邦;骨髓间质干细胞向软骨细胞表型定向诱导分化的实验研究[J];中华整形外科杂志;2002年01期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈晨;张毅;;Notch信号通路与间充质干细胞分化[J];中国实验血液学杂志;2010年02期

2 张琦,林玲,胡建石,郑志z，

本文编号：1294102