淋球菌外膜蛋白NspA在大肠杆菌中高效表达及其性能的初步研究

发布时间：2017-12-30 14:32

  本文关键词：淋球菌外膜蛋白NspA在大肠杆菌中高效表达及其性能的初步研究　出处：《四川大学》2006年博士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的：淋病是性传播疾病中最常见、发病率排列第一的疾病；也是我国最常报道的性病之一，不仅发病人数最多，而且有逐年上升趋势，其感染还有增加HIV易感性的可能。目前常用的抗生素治疗虽然可以缩短淋球菌感染持续的时间并减少其传播，但近年来淋球菌耐药菌株的增多和新型耐药株的不断出现，这一策略已经陷入困境和危机，因此迫切需要寻求新的预防和治疗方法，而疫苗的研究是首选的策略之一。迄今为止，国内外尚无预防淋病的疫苗问世。最近对奈瑟菌外膜蛋白NspA的研究发现，NspA具有高度的抗原保守性，其保守性高于同样是淋球菌候选抗原的PI蛋白。NspA蛋白持续表达暴露在细胞表面，诱导产生的抗NspA抗体有溶菌活性，因此，NspA是一个潜在的制备淋球菌疫苗的候选抗原，可望用于制备成防治淋病的疫苗。 本研究通过扩增淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)外膜蛋白nspA(Neisseria surface protein A)基因，构建pET-NspA重组子，实现NspA重组蛋白在大肠杆菌中的高效表达，通过金属离子亲和层析纯化表达蛋白，，免疫动物获得多克隆抗体血清，并对抗血清的性质进行初步研究，为后续研究淋球菌NspA的免疫学性能、相应的抗体制备及疫苗的研制奠定了基础，特别是为研制适合我国流行情况的相关疫苗奠定了坚实的基础。 方法：本研究分为三部分。 1．淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)外膜蛋白NspA原核表达质粒的构建及序列分析根据nspA基因序列特性，设计三套引物，用PCR方法自淋球菌基因组中扩增nspA目的片段。利用限制性内切酶剪切产生的粘性末端将扩增所得片段与原核表达质粒载体pET 30c(+)连接，构建重组质粒
[Abstract]:......
【学位授予单位】：四川大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R378;R759

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本文编号：1355359