ITF通过JAK-STAT3途径上调自身启动子的活性

发布时间：2018-01-01 20:42

  本文关键词：ITF通过JAK-STAT3途径上调自身启动子的活性　出处：《中南大学学报(医学版)》2014年11期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的:研究肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)对自身启动子活性的影响及Janus激酶/信号转导和转录激活因子(Janus kinase/signal transducers and activators of transcription,JAK/STAT)信号通路对其的调控作用。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR获取ITF基因5'侧翼序列,插入p GL3-Basic载体,构建ITF启动子重组载体;以不同浓度的ITF刺激,检测双荧光素酶的活性;运用JAK-STAT3通路特异性抑制剂AG490阻断JAKSTAT3信号通路,观察AG490对ITF启动子活性的影响。结果:酶切和直接测序法证实包含ITF启动子的重组质粒构建成功;瞬时转染实验显示,ITF能显著提高ITF启动子的活性(P0.05);加入AG490后ITF启动子活性显著下降(P0.05)。结论:ITF通过JAK-STAT3途径上调自身启动子的活性。
[Abstract]:Objective: To study the intestinal trefoil factor (intestinal trefoil, factor, ITF) activation factors on its promoter activity and Janus kinase / signal transduction and transcription (Janus kinase/signal transducers and activators of transcription, JAK/STAT) signal pathway on its regulation. Methods: the whole blood genomic DNA as template, PCR ITF gene 5'the flanking sequence, inserted into P GL3-Basic vector to construct recombinant vector ITF promoter; with different concentrations of ITF stimulated luciferase activity; using JAK-STAT3 specific inhibitor AG490 blocked JAKSTAT3 signaling pathway, the effect of AG490 on ITF promoter activity. Results: the enzyme digestion and sequencing confirmed that the recombinant plasmid containing ITF promoter the successful construction; transient transfection experiments revealed that ITF could significantly increase the activity of the ITF promoter (P0.05); adding AG4 90 ITF promoter activity was significantly decreased ( P0.05) conclusion: ITF up-regulated the activity of the self promoter through the JAK-STAT3 pathway.

【作者单位】： 徐州医学院附属淮海医院烧伤科;中国人民解放军第九七医院烧伤科;
【基金】：国家自然科学基金(81100252) 南京军区医学科研课题重点项目(12Z10)~~
【分类号】：R3416
【正文快照】： Methods:The 5'flanking sequence of the ITF gene was cloned from human whole bloodgenomic DNA by PCR.ITF promoter fragment was cloned and inserted into the p GL3-Basicvector to construct recombinant vector.ITF promoter vector was stimulated with ITF at va

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1366147