hFLVCR对红系造血调控的研究
本文关键词:hFLVCR对红系造血调控的研究 出处:《四川大学》2006年博士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】:人类猫白血病C亚类病毒受体(Human Feline Leukemia Virus Receptor,hFLVCR)广泛表达于CD34+造血干/祖细胞、血液细胞及其他人类组织和细胞系(如K562等)。最新研究发现hFLVCR有输出血红素(heme)的重要功能,从而可能在红系的早期分化过程中起重要作用,因此引起人们的关注。目前hFLVCR对于红系造血的作用和机制尚未完全阐明。有关FLVCR的功能和病理生理意义的研究在国外尚处于起步阶段,国内更无报道,故这是一个有待深入探讨的领域。 目的:1.体外动态观察氯高铁血红素(Hemin,Hm)诱导K562细胞向红系分化过程中hFLVCR的蛋白和mRNA的表达,以明确hFLVCR与红系造血之间的关系。2.将hFLVCR反义寡核苷酸转染K562细胞,封闭的含量及K562细胞的凋亡状况,旨在探讨hFLVCR对红系造血的影响hFLVCR的功能。通过细胞化学染色、免疫组化和流式细胞术等,观察K562细胞向红系分化情况、细胞内脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)和机制。 方法:1.用MTT法观察诱导剂Hm对K562细胞增殖的影响。2.采用流式细胞术和实时荧光定量PCR技术,动态观察氯高铁血红素诱导K562细胞向红系分化过程中hFLVCR的蛋白和mRNA的表达。3..用免疫组化法观察转染hFLVCR反义寡核苷酸,,阻断hFLVCR的表达后,K562
[Abstract]:Human Feline Leukemia Virus ReceptorhFLVCRs are widely expressed in CD34 hematopoietic stem / progenitor cells. Blood cells and other human tissues and cell lines (such as K562 et al.) have been found to have important functions in the production of heme by hFLVCR. This may play an important role in the early differentiation of erythroid. At present, the role and mechanism of hFLVCR in erythropoiesis have not been fully elucidated. The study on the function and pathophysiological significance of FLVCR is still in its infancy abroad. There is no report in China, so this is an area to be explored in depth. Objective to observe the expression of hFLVCR protein and mRNA in K562 cells during the differentiation of K562 cells in vitro. To clarify the relationship between hFLVCR and erythropoiesis. 2. Transfection of hFLVCR antisense oligodeoxynucleotides into K562 cells, blocking content and apoptosis of K562 cells. The purpose of this study was to investigate the effect of hFLVCR on erythropoiesis and to observe the differentiation of K562 cells into erythrocytes by cytochemical staining, immunohistochemistry and flow cytometry. Intracellular lipid peroxidation end product malondialdehyde (MDAA) and its mechanism. Methods 1. The effect of inducer Hm on the proliferation of K562 cells was observed by MTT assay. Flow cytometry and real-time fluorescence quantitative PCR were used to detect the effect of Hm on the proliferation of K562 cells. The expression of hFLVCR protein and mRNA in K562 cells induced by hemin was observed dynamically. 3. HFLVCR antisense oligonucleotides were detected by immunohistochemistry. K562 after blocking the expression of hFLVCR
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R33
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