人脑中硒蛋白W与鞘脂激活蛋白原相互作用的筛选与验证

发布时间：2018-01-21 22:59

  本文关键词： 硒蛋白W 酵母双杂交 荧光共振能量转移 Pull-down技术 免疫共沉淀 鞘脂激活蛋白原　出处：《生物化学与生物物理进展》2014年08期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：硒蛋白W(SelW)是人脑中一种重要的硒蛋白.在缺硒的条件下,SelW在脑中具有优先储备的特性,但其具体机制和在脑中的功能至今尚不清楚.本文以SelW突变体SelW′为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人胎脑文库进行筛选,获得与SelW相互作用的蛋白,其中一种为鞘脂激活蛋白原(PSAP).采用荧光共振能量转移技术中的受体漂白和敏化发射两种方法,验证了SelW与PSAP的相互作用.构建表达载体在大肠杆菌中成功表达出SelW′,利用Pull-down技术验证了SelW′与PSAP在细胞外的直接相互作用.采用免疫共沉淀的方法验证了上述两种蛋白在昆明小鼠脑组织中的内源性相互作用.基于SelW和PSAP的已知生物功能,推测SelW可能在脑部发育和神经退行性疾病形成过程中发挥着重要作用.
[Abstract]:SelW ( SelW ) is a kind of important protein in human brain . SelW ' s specific mechanism and its function in brain have not been clearly defined under the condition of selenium deficiency . The interaction between SelW and PSAP is verified by using the two methods of receptor bleaching and sensitization in fluorescence resonance energy transfer technology .

【作者单位】： 深圳大学生命科学学院 深圳市海洋生物资源与环境重点实验 深圳市微生物基因工程重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(31070731,21271131,21301120) 广东省自然科学基金(10151806001000023)资助项目~~
【分类号】：R3411
【正文快照】： 硒作为人体必需的微量元素,参与人体多种生理过程,具有多种生物学功能[1-2],而体内硒的生物功能主要是通过各种硒蛋白来实现[2].硒蛋白为一类特殊的蛋白质,其活性中心氨基酸硒代半胱氨酸(Sec)为通常作为终止码的TGA编码,导致硒蛋白的高表达十分困难,从而影响了硒蛋白构效关系

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本文编号：1452784