大肠埃希菌临床分离株高产AmpC酶与基因介导、突变表达方式的研究

发布时间：2018-01-24 03:03

  本文关键词： 大肠埃希菌(E.coli) AmpC酶 ESBLs 质粒 ampC启动子 衰减子 外膜蛋白　出处：《南京师范大学》2006年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：大肠埃希菌(E.coli)是引起尿路感染、呼吸道感染、伤口感染甚至全身感染的常见病原菌之一，它对三代头孢菌素耐药的主要原因是产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶。ESBLs来自突变的广谱β-内酰胺酶(如TEM-1，TEM-2，SHV-1)，由质粒携带能够水解氨氧头孢菌素和单环β-内酰胺类药物，可被克拉维酸(CA)抑制，最常见于E.coli和克雷伯菌属，也见于其他肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍德菌等细菌。AmpC酶有染色体介导和质粒介导两种基因携带状态，质粒介导的基因来源于染色体。AmpC酶能够水解氨氧头孢菌素、头霉菌素和单环β-内酰胺类药物，可被邻氯西林(CLO)抑制，不能被CA等其他β-内酰胺酶抑制剂抑制。染色体编码的ampC基因存在于大多数革兰阴性杆菌的染色体上(克雷伯菌属和奇异变形杆菌缺乏，沙门菌属尚不确定)，呈诱导表达；质粒编码的ampC基因多为非诱导表达。 E.coli染色体上携带ampC基因，但其操纵子与其他细菌染色体的ampC操纵子不同，因缺少调控基因ampR，呈低水平表达状态，酶产量非常低，临床意义不大。质粒型ampC基因转入或染色体上ampC基因启动或衰减序列突变，ampC结构基因突变或扩增，以及ampC调节基因的突变均能导致AmpC酶的高表达。质粒型AmpC酶和染色体突变型AmpC酶的出现不仅使E.coli的耐药性增强而且直接干扰了临床微生物实验室对ESBLs的检测，增加了临床治疗的难度。 本课题收集南京军区南京总医院临床微生物实验室2001年1月至2004年10月临床各类标本中分离的可疑同时产AmpC酶和ESBLs或单产AmpC酶的40株E.coli，采用一系列的方法对耐药表型、高活性β-内酰胺酶的类型和特点、ampC基因携带和突变表达方式、以及细菌外膜蛋白的改变进行研究，并探讨提高ESBLs检出率和区别AmpC酶的、适用于常规实验室的检测方法。 在抗菌药物敏感试验中，，40株菌均呈多重耐药，对头孢三嗪(CRO)、头孢噻肟(CTX)和头孢他啶(CAZ)3种三代头孢菌素中的2种以上出现耐药，对环丙沙
[Abstract]:Escherichia coli is one of the common pathogens causing urinary tract infection respiratory tract infection wound infection and even systemic infection. The main reason for its resistance to the third generation cephalosporins is the production of extended-spectrum 尾 -lactamases (ESBLss) and AmpC enzymes. ESBLs are derived from mutated broad-spectrum 尾 -lactamases (such as TEM-1). TEM-2HV-1, carried by plasmids capable of hydrolyzing aminoglycocephalin and monocyclic 尾 -lactam, can be inhibited by clavulanate (CAA), most commonly in E. coli and Klebsiella. Also found in other Enterobacteriaceae bacteria, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cepacia and other bacteria. AMPC enzyme has chromosomal and plasmide-mediated gene carrying state. Plasmid mediated genes derived from chromosomes. AMPC can hydrolyze amoxycephalosporins, cephalosporins and monocyclic 尾 -lactams, which can be inhibited by o-chloracillin (CLO). AmpC genes encoded by chromosomes are present on the chromosomes of most gram-negative bacilli (Klebsiella and Proteus mirabilis are deficient). Salmonella is still unknown and is induced to express. Most of the ampC genes encoded by plasmids were uninduced. Coli chromosomes carry the ampC gene, but its operon is different from the ampC operon of other bacteria chromosomes, because of the lack of regulation gene ampr, it is low level expression. The plasmid type ampC gene was transferred into or the chromosome of ampC gene initiated or attenuated sequence mutation or mutation of ampC structure gene mutation or amplification. The mutation of ampC regulatory gene can lead to the high expression of AmpC enzyme. The emergence of plasmid type AmpC enzyme and chromosome mutant AmpC enzyme not only increase the resistance of E. coli but also directly dry it. It interferes with the detection of ESBLs in clinical microbiology laboratory. It increases the difficulty of clinical treatment. This study collected suspected simultaneous production of AmpC enzyme and ESBLs or Amp per unit from clinical microbiology laboratory of Nanjing General Hospital of Nanjing military region from January 2001 to October 2004. 40 strains of C enzyme E. coli. A series of methods were used to study the phenotype of drug resistance, the type and characteristics of high activity 尾 -lactamases, and the expression patterns of AMPC gene and the changes of bacterial outer membrane proteins. The methods of improving the detection rate of ESBLs and differentiating AmpC enzyme were discussed. In antimicrobial susceptibility test, 40 strains were multidrug resistant to ceftriaxine (CRO). Cefotaxime (CTX) and ceftazidime (Ceftazidime) were resistant to ceftazidime in 3 generations of cephalosporins.
【学位授予单位】：南京师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R378.2

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本文编号：1458992