两种细胞因子联合诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化

发布时间：2018-02-22 21:49

  本文关键词： 干细胞 骨髓干细胞 神经营养因子 骨髓间充质干细胞 种子细胞 碱性成纤维细胞生长因子 表皮生长因子 诱导 分化 周围神经损伤　出处：《中国组织工程研究》2014年06期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：背景:骨髓间充质干细胞可被定向诱导分化为神经样细胞,理论上骨髓间充质干细胞可作为种子细胞应用于周围神经组织工程。目的:用2种细胞因子联合诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞,进一步探讨其在周围神经损伤方面的应用。方法:从Wistar大鼠胫骨和股骨提取骨髓间充质干细胞,采用差速贴壁法进行培养和纯化,联合应用碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子对细胞进行诱导,观察细胞形态变化,并用免疫组织化学方法检测骨髓间充质干细胞中神经元特异性标志物的表达;并研究终止诱导后骨髓间充质干细胞的形态及免疫组织化学方面的变化。结果与结论:骨髓间充质干细胞经诱导后呈典型神经细胞样改变,有两个或多个突起,突起之间相互连接成网状,可见细胞核及核仁,免疫组化检测神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白及突触素蛋白表达阳性。撤除诱导条件后大部分细胞逐渐恢复原来的成纤维细胞样形态,上述3种蛋白的表达量明显下降。表明应用神经营养因子可诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞,但其形态及组织学变化仅能维持一段较短的时间。
[Abstract]:Background: bone marrow mesenchymal stem cells can be induced to differentiate into neural like cells. In theory, bone marrow mesenchymal stem cells can be used as seed cells in peripheral nerve tissue engineering. Methods: bone marrow mesenchymal stem cells were extracted from tibia and femur of Wistar rats and cultured and purified by differential adherent method. Basic fibroblast growth factor (bFGF) and epidermal growth factor (EGF) were used to induce the cells to observe the morphological changes and the expression of neuronal specific markers in bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) was detected by immunohistochemistry. The morphological and immunohistochemical changes of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) after termination of induction were studied. Results and conclusions: BMSCs showed typical neuronal changes after induction with two or more processes. The nuclei and nucleoli were seen in the nuclei and nucleoli, and the neuron-specific enolase was detected by immunohistochemistry. The expression of neurofilament protein and synaptophysin protein was positive. The expression of these three proteins decreased obviously, which indicated that the application of neurotrophic factor could induce the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neuron-like cells, but the morphological and histological changes could only be maintained for a short period of time.
【作者单位】： 荆门市中医医院(市石化医院)骨伤科;解放军广州军区武汉总医院骨科;
【分类号】：R329.2

【参考文献】

相关期刊论文 前8条

1 姜琨,秦樾,童坦君;erbB-2表达抑制与表皮生长因子刺激对信号转导与转录激活分子及细胞周期蛋白D1的影响[J];北京医科大学学报;1998年03期

2 董光龙,王俊义,王为忠,贾同文;表皮生长因子减少腹部辐射肠外营养大鼠肠道细菌移位[J];第四军医大学学报;2000年01期

3 王涛,王俊义,陈冬利,王为忠,罗兰;表皮生长因子对胰腺炎相关蛋白基因表达及胰腺炎的影响[J];第四军医大学学报;2000年11期

4 周欣,黄志华,林汉华;表皮生长因子与小儿消化性溃疡[J];华中医学杂志;2000年02期

5 赵培林，王慧敏，，李肇特;下颔下腺切除对大鼠胃粘膜影响的组织学和组织化学观察[J];解剖学报;1994年03期

6 王阁,汪思应,许望翔,杨晓明;肝部分切除及表皮生长因子迅速诱导PC3基因的表达[J];科学通报;2000年20期

7 孙秀,陈先文,陈生弟;FGF和EGF对神经干细胞增殖及分化的影响[J];中国神经科学杂志;2000年02期

8 胡辉;张伟才;黄继锋;严琼娇;殷义霞;李世普;;新型神经导管复合材料与骨髓间充质干细胞的相容性[J];中国组织工程研究;2013年16期

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 陈冬利,王为忠,王俊义,王涛;表皮生长因子防治急性胰腺炎大鼠肠道细菌易位[J];第二军医大学学报;2002年04期

2 吴靖芳;顾彩霞;张静;郑慧娥;王浩宇;张江兰;;大鼠实验性胃溃疡期间下颌下腺TFF3基因的变化[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2010年01期

3 李春波;陈增淦;陈统一;张峰;;周围神经缺损修复研究进展[J];国际骨科学杂志;2013年06期

4 尚云龙;李一帆;宁云峰;吕元石;李晓霜;赵杰;李聪聪;;大鼠脊髓损伤模型的解剖学参考定位[J];解剖学研究;2013年06期

5 刘耀宗;邱建武;蒋英;;NSE及脑电图在脑损伤综合征中早期诊断的意义[J];赣南医学院学报;2014年02期

6 林明;靳平燕;;探讨神经元烯醇化酶及脑活性肽100β蛋白在毒蕈中毒患者中的应用[J];标记免疫分析与临床;2014年04期

7 陈一鑫;陈克诚;朱一洲;廖小林;黄有荣;;脊髓损伤动物模型研究概况[J];大众科技;2014年05期

8 廖小金;;表皮生长因子结构和生物学效应[J];海峡药学;2006年05期

9 杜立建;冯胜阁;张燕红;马建伟;;炎黄四虫通脉灵对大鼠截瘫作用机制的实验研究[J];河北中医;2009年10期

10 张卫红,王道新,曹晓建,秦晓东,冯振卿;脊髓损伤后bFGF和GFAP的变化及其意义[J];济宁医学院学报;2001年02期

相关会议论文 前1条

1 钱军;孙正义;钱耀文;马延超;夏亚一;王栓科;;大鼠脊髓损伤后GFAP的表达及其和运动功能恢复的相关性[A];全国胸椎管狭窄症专题研讨会论文汇编[C];2006年

相关博士学位论文 前10条

1 李相运;小鼠胚胎干细胞多能性研究[D];西北农林科技大学;2001年

2 扈玉华;实验性大鼠急性脊髓损伤NF-κB表达及八肽胆囊收缩素抗炎作用分子机制研究[D];河北医科大学;2002年

3 宋晓平;小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成骨细胞研究[D];西北农林科技大学;2003年

4 周雯;羊颌下腺表皮生长因子的分离、纯化对胃肠黏膜炎性疾病的治疗作用及其机制探讨[D];浙江大学;2004年

5 沈雪莉;新生大鼠皮层神经干细胞定向分化为神经元过程中溶酶体与微管蛋白的相关性研究[D];中国医科大学;2004年

6 林秋霞;大脑皮层神经元体外诱导分裂研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

7 范志勇;EGF、Gln和pGRF基因质粒对早期断奶仔猪生长及肠道发育的影响[D];四川农业大学;2004年

8 魏社鹏;新霉素联合苯丁酸钠对脑胶质瘤的抑制作用研究[D];复旦大学;2004年

9 智庆文;人表皮生长因子的偏爱性表达及生化药理性质[D];四川农业大学;2005年

10 李爱群;阿朴吗啡促进多巴胺能神经元存活的机理研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2006年

相关硕士学位论文 前10条

1 张丽丽;脯氨酸对脂多糖刺激仔猪生长性能的影响及其机理[D];武汉工业学院;2010年

2 王志峰;表皮生长因子受体在垂体腺瘤中的表达和临床意义[D];广西医科大学;2011年

3 黄金城;骨髓间充质干细胞对脊髓损伤后胶质瘢痕影响的实验研究[D];福建医科大学;2011年

4 胡传宇;EGF、EGFR在相近临床分期不同预后舌鳞癌中的表达的初步研究[D];中南大学;2011年

5 刘东义;梗阻性黄疸胆汁细菌学特点的临床分析[D];山东大学;2011年

6 张卫红;大鼠损伤脊髓bFGF和GFAP表达以及MPSS干预性治疗的研究[D];南京医科大学;2001年

7 邢峰;EGF对大鼠肠道缺血—再灌注损伤的防治作用及其相关机制的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年

8 康军;舒拉明对体外培养的人视网膜色素上皮细胞增殖及移行的影响[D];第四军医大学;2002年

9 周思朗;碱性成纤维细胞生长因子对阿尔茨海默病模型大鼠行为学影响及可能机制[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年

10 李开荣;β淀粉样蛋白25-35对大鼠神经干细胞的毒性和雌激素的保护作用[D];郑州大学;2003年

【二级参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 张文捷,李兵仓,王建民,王建忠,陈建梅;组织工程人工神经诱导管的制备及其在体外与大鼠体内降解性能研究[J];第三军医大学学报;2004年13期

2 赵培林;表皮生长因子与胃粘膜[J];国外医学.内分泌学分册;1991年04期

3 Marti U ,严伯初;表皮生长因子特别是对胃肠道和肝脏的生物效应:最新看法[J];国外医学(消化系疾病分册);1990年01期

4 程峰;郝怀勇;田和平;代学良;李立新;;体外诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化及凋亡的研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2010年01期

5 胡辉;黄继锋;张伟才;殷义霞;李宾斌;;神经营养因子体外诱导鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的基础研究[J];华南国防医学杂志;2012年06期

6 万志涛;殷义霞;王永红;严琼姣;袁琳;李世普;;PNGF复合材料的神经生长因子缓释性能[J];武汉理工大学学报;2010年12期

7 余畅;邱彤;严琼娇;殷义霞;李世普;;PNGF复合材料对PC12细胞GAP43和β-TubulinⅡ基因的调控[J];武汉理工大学学报;2011年05期

8 徐龙强;隋静;丁钰;刘广义;王清;郭云良;;大鼠骨髓间充质干细胞体外培养转化为神经细胞的实验[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年07期

9 向杰;黄继锋;李德忠;李世普;闫玉华;严琼姣;;新型仿生人工神经导管诱导犬周围神经再生过程的组织学观察[J];中国组织工程研究;2012年21期

10 许春娣,奚容平,陈舜年,徐家裕;消化性溃疡患儿唾液、胃液和血清中表皮生长因子含量[J];中华儿科杂志;1998年11期

【相似文献】

相关期刊论文 前4条

1 黄建锋;黄继锋;张伟才;;两种细胞因子联合诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化[J];中国组织工程研究;2014年06期

2 王宪英;吴红海;秦亚斌;侯艳宁;;脑组织匀浆诱导人脐带间充质干细胞分化为神经样细胞[J];中国老年学杂志;2012年07期

3 谌宏鸣,谢富康;Brn-3a诱导胚胎干细胞向神经样细胞定向分化的研究[J];解剖学报;2002年06期

4 ;[J];;年期

相关会议论文 前2条

1 陈丽;井绪东;何冬梅;张洹;房宝英;;体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经样细胞分化的研究[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年

2 陈澄;陈誉华;;大肠杆菌ibeB基因诱导HeLa细胞分化成神经样细胞[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编[C];2002年

相关博士学位论文 前3条

1 王晨光;GAP-43在骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程中作用机制研究[D];吉林大学;2009年

2 尚德淑;鼠胚胎干细胞向神经样细胞诱导分化的研究[D];中国医科大学;2003年

3 朱天琦;GDNF和NT-3双基因诱导BMSCs分化为神经样细胞的实验研究[D];华中科技大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 周俊松;骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程的可塑性研究[D];苏州大学;2008年

2 夏冰;终丝诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞[D];郑州大学;2006年

3 张雪;大脑神经营养因子促进骨骼肌肌源性干细胞转化为神经样细胞的实验研究[D];山东大学;2009年

4 南成睿;川芎嗪体外诱导人脐带间充质干细胞分化为神经样细胞[D];河北医科大学;2014年

5 郑煜;骨髓间充质干细胞体外定向分化为神经样细胞的研究[D];广州医学院;2010年

6 闫冬冬;黄连素体外诱导人脐带间充质干细胞向神经样细胞分化[D];河北医科大学;2013年

7 王冠;碱性成纤维生长因子（bFGF）对骨髓间充质干细胞增殖及向神经样细胞分化的影响[D];兰州大学;2014年

8 宋琳;抑制Rac1表达对骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的影响研究[D];苏州大学;2008年

9 徐路尧;Rac1与骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程关系的研究[D];苏州大学;2008年

10 胡泳菊;骨髓源神经样细胞移植对兔SCSG受损修复作用的研究[D];南华大学;2014年

本文编号：1525392