汉滩病毒G1蛋白胞质区ITAM样基序功能的研究
本文选题：汉坦病毒 切入点：囊膜糖蛋白类 出处：《病毒学报》2007年06期 论文类型：期刊论文
【摘要】：汉滩病毒(HTNV)的G1蛋白胞质区尾段包含保守的免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)样基序,该基序与许多重要的免疫受体胞质区ITAM基序同源性较高。为了研究HTNV的G1 ITAM样基序的免疫信号转导功能,首先人工合成了一段保守的酪氨酸残基磷酸化的G1 ITAM样基序多肽,应用体外蛋白激酶共沉淀实验,分别从Jur-kat细胞和Raji细胞裂解物中初筛到5~9种与该基序相互作用的磷酸化蛋白或激酶;然后通过突变体分析、体外磷酸化实验和体外激酶共沉淀-免疫印迹分析,进一步确证了G1 ITAM样基序在体外可以与Src家族蛋白酪氨酸激酶(PTK)Lyn、Fyn及其下游Syk家族激酶Syk、ZAP-70相互作用,而这种相互作用依赖于该基序中两个高度保守的酪氨酸残基的存在。上述研究表明,HTNV G1蛋白胞质区包含一个高度保守的功能性ITAM样基序,该基序在体外可以与TCR和BCR信号转导中关键的PTK相互作用,为进一步探讨HTNV G1蛋白ITAM样基序在肾综合征出血热(HFRS)免疫信号传递中的作用奠定了基础。
[Abstract]:The cytoplasmic region of G1 protein of Hantaan virus (HTNV) contains conserved tyrosine activation motifs like motifs. In order to study the immuno-signal transduction function of HTNV G1 ITAM like motif, we synthesized a polypeptide of conserved tyrosine residues phosphorylated G1 ITAM like motifs. In vitro protein kinase coprecipitation assay was used to screen 9 phosphorylated proteins or kinases interacting with this motif from Jur-kat cells and Raji cell lysates respectively. In vitro phosphorylation assay and in vitro kinase coprecipitation and Western blotting analysis further confirmed that G1 ITAM like motif could interact with Src family protein tyrosine kinase (PTK), Src protein tyrosine kinase (PTK), and its downstream Syk family kinase, Sykton-ZAP-70, in vitro, and further confirmed that G 1 ITAM like motif could interact with Src family protein tyrosine kinase. This interaction depends on the existence of two highly conserved tyrosine residues in the motif. This motif can interact with the key PTK in TCR and BCR signal transduction in vitro, which lays a foundation for further exploring the role of HTNV G1 ITAM like motif in the immune signal transduction of hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS).
【作者单位】： 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 德州大学医学院病理和内科学系 哈佛大学艾滋病研究中心和感染病科 德州大学医学院病理和内科学系 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心
【基金】：国家自然科学基金(No.30471540)
【分类号】：R373.9
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，本文编号：1574436
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