人lambda1和epsilon干扰素基因的克隆和在WI-38细胞中的表达及其活性比较

发布时间：2018-03-15 09:50

  本文选题：lambdal干扰素　切入点：epsilon干扰素　出处：《苏州大学》2007年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 目的：研究新型干扰素hIFN-λ1和hIFN-ε基因在WI-38细胞中的表达及其生物学活性，并进行对比分析。 方法：利用PCR法由原重组表达载体重新构建His重组融合表达载体pcDNA3.1A-hIFN-λ1-His和pcDNA3.1A-hIFN-ε-His，脂质体法分别转染WI-38人胚肺细胞，G418筛选获得转基因细胞并经PCR、RT-PCR和dot-ELISA鉴定。采用微量细胞病变抑制试验研究和比较rhIFN-λ1-His和rhIFN-ε-His对HSV-Ⅰ、PolioV和Ad3病毒的抗病毒活性；MTT法检测其对SHG-44、MDA-MB-231和SMMC-7721肿瘤细胞生长的影响；RT-PCR相对定量法检测其诱导WI-38和SHG-44细胞产生人MxA抗病毒蛋白的活性。 结果：结果表明WI-38细胞中能够稳定表达rhIFN-λ1-His和rhIFN-ε-His蛋白，两者均具有抗HSV-Ⅰ、PolioV、Ad3病毒活性和抑制SHG-44、MDA-MB-231和SMMC-7721肿瘤细胞的生长，，并均能诱导WI-38和SHG-44细胞产生MxA蛋白；但rhIFN-λ1-His抗病毒活性、抗肿瘤细胞增殖活性和诱导产生MxA蛋白活性要强于rhIFN-ε-His。 结论：hIFN-λ1和hIFN-ε干扰素的抗病毒效应的分子机理均与诱导细胞产生MxA抗病毒蛋白相关。本研究为进一步探讨和比较hIFN-λ1和hIFN-ε的生物学活性及其作用机制奠定了一定的基础。
[Abstract]:Aim: to study the expression and biological activity of hIFN- 位 1 and hIFN- 蔚 genes in WI-38 cells. Methods: His fusion expression vectors pcDNA3.1A-hIFN- 位 1-His and pcDNA3.1A-hIFN- 蔚 -Hiswere constructed by PCR method from the original recombinant expression vector. The transgenic cells were screened by liposome transfection into WI-38 human embryonic lung cells and identified by RT-PCR and dot-ELISA. The antiviral activity of rhIFN- 位 1-His and rhIFN- 蔚 -His on HSV- 鈪

本文编号：1615502