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HIV多表位核酸疫苗免疫实验及鸡痘病毒转移载体的构建研究

发布时间:2018-03-26 02:00

  本文选题:HIV 切入点:多表位基因 出处:《吉林大学》2007年硕士论文


【摘要】: 本研究利用已经设计并人工合成的多表位基因,以HIV-1巨分子颗粒p24为支架,连入安全的真核表达载体质粒pVAX1,构建了新型HIV多表位重组DNA疫苗(pVAX1-MEGN-p24),细胞转染结果表明,pVAX1-MEGN-p24成功地表达了MEGNp24抗原蛋白。将该重组质粒免疫小鼠,实验结果显示,该重组质粒能够诱导免疫小鼠产生针对HIV细胞免疫和体液免疫,并且以细胞免疫为主。佐剂重组核酸疫苗组具有稳定的特异性CTL反应作用。 本研究还构建了新型鸡痘病毒转移载体,并利用该载体获得了一株含HIV多表位基因的重组鸡痘病毒株,运用RT-PCR和IFA方法检测了外源基因重组及鸡痘病毒在鸡胚成纤维细胞中的表达状况。实验结果显示,外源基因已正确重组入鸡痘病毒基因组,且可在鸡胚成纤维细胞中进行有效表达。
[Abstract]:This study has been designed and synthesized by the multi epitope gene, with HIV-1 macromolecule particle p24 as scaffold, even into the safety of eukaryotic expression plasmid pVAX1 to construct a new HIV recombinant multi epitope DNA vaccine (pVAX1-MEGN-p24), cell transfection results showed that pVAX1-MEGN-p24 was successfully expressed in the MEGNp24 antigen protein. The recombinant plasmid in mice, experimental results showed that the recombinant plasmid could induce mice immunized against HIV cell immunity and humoral immunity, and the immune cells. The recombinant DNA vaccine adjuvant group with specific CTL reaction stability.
This study also constructed a new type of fowlpox virus vector, and the vector was obtained with HIV multi epitope recombinant fowlpox virus strain gene, using RT-PCR and IFA method for detection of recombinant fowlpox virus and expression of exogenous gene into cells in chicken embryo fiber. The experimental results showed that the exogenous gene has the correct recombinant the fowlpox virus genome, and in chick embryo fibroblasts express effectively.

【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R392;Q78

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