OPN影响小鼠MSCs迁移及其相关分子机制研究

发布时间：2018-03-29 17:09

  本文选题：骨桥蛋白质　切入点：骨髓间充质干细胞　出处：《重庆医学》2014年04期

【摘要】：目的探讨外源骨桥蛋白(OPN)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)迁移能力的影响。方法采用OPN-/-小鼠和野生型C57小鼠,进行MSCs的原代分离培养,流式细胞术鉴定分拣MSCs细胞传代培养;Transwell迁移实验检测OPN是否能够诱导MSCs定向迁移;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测OPN、CD44和Integrinβ1相关蛋白的表达变化。结果传代后的细胞形态符合MSCs特征,细胞表达CD44和CD105,但不表达CD34,符合MSCs表面标记抗原的一般规律。0.5μg/mL的OPN能增加体外MSCs的细胞迁移,而野生型C57小鼠MSCs细胞迁移为最多。同时,这一趋势与OPN作用时间正相关,与OPN-/-小鼠相比,差异均有统计学意义(P0.05)。0.5μg/mL重组OPN蛋白量明显增加,但仍低于野生型C57小鼠,差异有统计学意义(P0.01)。若以OPN-/-小鼠为基数100,0.5μg/mL重组OPN组CD44、Integrinβ1蛋白表达增多,差异有统计学意义(P0.01);而野生型C57小鼠细胞CD44、Integrinβ1蛋白表达最多,差异有统计学意义(P0.01)。结论 OPN可以通过上调CD44、Integrinβ1的表达,促进MSCs定向迁移。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of osteopontin (OPN) on the migration of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) in mice. Flow cytometry (FCM) was used to detect whether OPN could induce the directional migration of MSCs cells and the expression of CD44 and Integrin 尾 1 related proteins were detected by Western blot.The results showed that the morphology of cultured MSCs cells was in accordance with the characteristics of MSCs, and the expression of CD44 and Integrin 尾 1 related proteins were detected by Western blotting. The cells expressed CD44 and CD105, but did not express CD34. OPN with 0.5 渭 g/mL in accordance with the general rule of MSCs surface marker antigen could increase the cell migration of MSCs in vitro, while the MSCs cells of wild-type C57 mice had the most migration. Meanwhile, this trend was positively correlated with the time of OPN treatment. Compared with OPN-r-mice, the amount of recombinant OPN protein of P0.05U. 0.5 渭 g/mL was significantly increased, but still lower than that of wild-type C57 mice, and the difference was statistically significant (P 0.01). If the expression of CD44 integrin 尾 1 protein was increased in the recombinant OPN group based on 100n- / -mouse, the expression of CD44 integrin 尾 1 protein was increased. The difference was statistically significant (P 0.01), while the expression of CD44N integrin 尾 1 protein was the highest in wild-type C57 mice. Conclusion OPN can promote the directional migration of MSCs by up-regulating the expression of CD44G integrin 尾 1.
【作者单位】： 第三军医大学附属西南医院整形外科;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81071563)
【分类号】：R329

【共引文献】

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本文编号：1682061