细粒棘球绦虫p38蛋白原核表达及其多克隆抗体制备（英文）

发布时间：2018-04-11 06:54

  本文选题：细粒棘球绦虫 + p　； 参考：《中国人兽共患病学报》2014年01期

【摘要】：目的制备细粒棘球绦虫(Eg)p38蛋白的多克隆抗体,为进一步研究Egp38蛋白的功能提供检测抗体。方法将Egp38蛋白基因序列克隆至原核表达载体pET28a,转化E.coli BL21株,IPTG诱导蛋白表达,以Ni亲和层析纯化Egp38蛋白,免疫家兔,收集免疫血清,ELISA测定抗体效价,Western blotting检测所制备抗体与Eg虫体天然Egp38蛋白的反应性。结果经0.2mmol/L IPTG诱导,表达出约46kDa的Egp38重组蛋白,制备获得效价在2.56×105以上的多克隆抗体,该抗体能够与Egp38重组蛋白和Eg蚴虫体内的Egp38蛋白发生特异性反应。结论成功制备获得兔抗Egp38多克隆抗体,为研究Egp38在Eg与宿主间的交互作用中的功能和作为药物靶标等研究奠定基础。
[Abstract]:Objective to prepare the polyclonal antibody against Echinococcus granulosus Echinococcus granulosus Echinococcus granulosus (Echinococcus granulosus) p38 protein and to provide an antibody for further study on the function of Echin@@Methods the Egp38 gene sequence was cloned into prokaryotic expression vector pET28a, and then transformed into E.coli BL21 strain. Egp38 protein was purified by Ni affinity chromatography and immunized rabbits.The antibody titer was determined by Elisa and the reactivity of the prepared antibody to the natural Egp38 protein of the egg worm was detected by Western blotting.Results induced by 0.2mmol/L IPTG, the recombinant Egp38 protein of about 46kDa was expressed, and the polyclonal antibody with titer above 2.56 脳 10 5 was obtained. The antibody could react specifically with the Egp38 protein of Egp38 recombinant protein and Eg cercaria.Conclusion Rabbit polyclonal antibody against Egp38 was successfully prepared, which laid a foundation for the study of the function of Egp38 in the interaction between E.gand and host and as a drug target.
【作者单位】： 新疆大学生命科学与技术学院 新疆生物资源基因工程重点实验室;新疆医科大学第一附属医院 新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地;
【基金】：Supported by the National Natural Science Foundation of China(Nos.81000746&81360251)~~
【分类号】：R392.1

【共引文献】

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