RNA干扰技术抑制3T3-L1脂肪细胞中脂联素的表达

发布时间：2018-04-14 21:08

  本文选题：3T3-L1前脂肪细胞 + 细胞培养　； 参考：《重庆医科大学》2006年硕士论文

【摘要】： 目的:优化3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化方案;观察细胞诱导分化过程中的生理学及形态学变化。 方法:常规培养前脂肪细胞,采用IBMX+地塞米松+胰岛素+DMEM+10%FCS诱导方案分化细胞48h,再用含胰岛素的DMEM+10%FCS培养48h,然后用DMEM+10%FCS维持培养直至分化成熟;光镜下及油红O染色观察第0天,第5天,以及第9天细胞的形态学改变。 结果:分化后的3T3-L1前脂肪细胞逐渐变圆,突触收缩,体积增大,光镜下立体感增强,胞浆内出现较多大而圆的脂滴,油红O染色呈桔红色。到第9天,大部分前体细胞分化为能分泌脂联素的成熟脂肪细胞,可用于第二阶段实验。 结论:采用该诱导分化及进展维持方案,细胞分化成功率高,分化进度均一,且尽可能的避免了分化刺激因子对脂联素表达的抑制作用,为第二阶段实验提供了良好的细胞模型。
[Abstract]:Aim: to optimize the induction and differentiation of preadipocytes from 3T3-L1 and to observe the physiological and morphological changes in the process of differentiation.Methods: adipocytes were cultured with IBMX dexamethasone insulin DMEM 10s for 48h, then DMEM 10s containing insulin for 48h, and then DMEM 10s for 48 h.The morphological changes of the cells were observed on day 0, day 5 and day 9 under light microscope and oil red O staining.Results: after differentiation of 3T3-L1, adipocytes gradually became round, synaptic contraction, volume increased, stereosensory increased under light microscope, more large and round lipid droplets appeared in the cytoplasm, and oil red O staining was orange red.On the 9th day, most of the precursor cells differentiated into adiponectin secreting adipocytes, which could be used in the second stage experiment.Conclusion: with this strategy of differentiation induction and progression maintenance, the cell differentiation success rate is high, differentiation progress is uniform, and the inhibitory effect of differentiation stimulating factor on adiponectin expression is avoided as far as possible.It provides a good cell model for the second stage experiment.
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R329.2

【共引文献】

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本文编号：1751021