三维培养对脐带间充质干细胞表型及造血因子基因表达的影响
本文选题:脐带 + 间充质干细胞 ; 参考:《中国实验血液学杂志》2014年05期
【摘要】:本研究探讨三维立体培养条件下脐带间充质干细胞(UC-MSC)的细胞表型变化及部分造血相关因子的基因表达,为下一步研究三维立体条件下的造血扩增及诱导分化提供基础。从脐带中分离出MSC,分别在二维及三维条件下培养,通过流式细胞术检测MSC表面抗原的表达水平,通过成血管试验比较了两种细胞的成血管能力,并通过实时定量PCR检测两种培养条件下造血相关细胞因子的基因表达情况。结果表明:从脐带中成功地分离出了MSC,在三维培养条件下其内皮细胞、内皮祖细胞和间充质原始干细胞的表面标记CD31、CD133和CD271等阳性细胞百分比显著增加,体外成血管能力增强;骨架蛋白β-actin基因在三维培养条件下表达上调,G-CSF、LIF、SCF、IL-1α、IL-1β、IL-3、IL-7和IL-11等与造血调控有关的细胞因子基因表达也有不同程度的增高,其中LIF、IL-3和IL-7升高尤为明显;免疫调控相关的细胞因子IL-10的表达也增高,而SDF-1和IL-6的表达虽有轻微的降低,但无显著性差异。结论:三维培养条件下UC-MSC的CD31、CD133和CD271表达上调,体外成血管能力增强,并且多个造血相关因子的基因表达水平上调。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the phenotypic changes of UC-MSCs and the gene expression of some hematopoietic related factors in three-dimensional culture, which provided the basis for the further study of hematopoietic amplification and differentiation in three-dimensional culture. MSCs were isolated from umbilical cord and cultured in two and three dimensional conditions. The expression of MSC surface antigen was detected by flow cytometry. The vascularization ability of the two kinds of cells was compared by vascularization test. The gene expression of hematopoietic related cytokines was detected by real-time quantitative PCR. The results showed that the percentage of positive cells such as endothelial cells, endothelial progenitor cells and mesenchymal stem cells, such as CD31, CD133 and CD271, were significantly increased and the ability of vascular formation was enhanced in vitro. The expression of cytoskeleton 尾 -actin gene up-regulated the expression of IL-7 and IL-7 genes related to hematopoietic regulation, such as IL-7 and IL-11, which were related to hematopoietic regulation in different degree, especially in LIF-IL-3 and IL-7. The expression of IL-10, a cytokine related to immunomodulation, was also increased, while the expression of SDF-1 and IL-6 decreased slightly, but there was no significant difference. Conclusion: the expression of CD31, CD133 and CD271 in UC-MSC was up-regulated, and the ability of angiogenesis was enhanced in vitro, and the gene expression level of several hematopoietic related factors was up-regulated.
【作者单位】: 山东大学附属济南市中心医院医学实验诊断中心;山东大学齐鲁医院低温医学研究室;
【基金】:973基金项目(2012CB966504) 山东大学自主创新基金(2012ZD023)资助
【分类号】:R329.28
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,本文编号:1817130
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