大脑皮层神经元原代培养方法的改良及一种体外缺氧缺糖简易模型的建立

发布时间：2018-05-10 11:32

  本文选题：SD胎鼠 + 神经元　； 参考：《中南药学》2014年05期

【摘要】：目的改进SD胎鼠大脑皮层神经元体外原代培养方法及其一种缺氧缺糖(OGD)简易模型建立。方法用温和的TrypLE胰酶消化得到单个皮层神经细胞,用含有B27的Neurobasol培养基进行培养。培养7 d后,将其培养液换成无糖DMEM培养液,放入缺氧装置中分别培养4、5及6 h,利用MTT法检测细胞存活率,并用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养液中LDH的释放量。结果分离和培养的神经元生长状态良好,免疫荧光方法证明该方法培养的大脑皮层神经元纯度可达到(93.2±1.3)%,能够达到实验研究的要求。细胞OGD 4、5及6 h后,细胞存活率分别为(52.7±1.3)%、(26.5±3.3)%及(20.8±1.1)%;LDH的释放量分别为(52.9±4.8)%、(89.3±1.3)%及(93.2±1.1)%。结论改良后的培养方法能够稳定地获得高纯度的SD胎鼠大脑皮层神经元,用厌氧发生装置替代三气培养箱建立了一种OGD简易模型,同时选择OGD 4 h作为缺氧缺糖模型最佳时间点。
[Abstract]:Objective To improve the in vitro primary culture of neurons in cerebral cortex of SD rats and to establish a simple model of hypoxia - deficient glucose ( OGD ) .

【作者单位】： 暨南大学药学院新药研究所;
【基金】：国家重大新药创制-候选药物研究(No.2012ZX09103101-055) 广东省医学科研基金项目(No.A2013353) 暨南大学科研培育与创新基金项目(No.21611321和No.21613331)
【分类号】：R329.2

【参考文献】

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【共引文献】

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