可视化胰蛋白酶原Ⅱ外分泌功能转基因小鼠的制备研究

发布时间：2018-05-19 15:20

  本文选题：胰蛋白酶原Ⅱ + 胰腺外分泌功能　； 参考：《第一军医大学》2005年硕士论文

【摘要】：胰腺外分泌功能研究是为了从生理的角度观察胰腺的正常分泌的过程或从病理生理的角度来探讨胰腺疾病的发病机制。本实验利用显微注射技术试图建立一种胰腺外分泌功能的转基因动物模型,利用整体成像仪能够在活体内动态地观察到胰蛋白酶原Ⅱ的分泌过程。为研究胰腺外分泌功能生理机制和与胰腺外分泌功能相关的疾病(如胰腺炎、胰腺癌)的发生、发展过程的病理生理机制以及筛选治疗上述疾病的药物提供理想的动物模型。为此,本文进行了如下的研究: 1.目的基因的构建: 1.1 胰蛋白酶原Ⅱ信号肽(Pre-pro)基因的构建:采用人工合成Pre-pro基因:5′aattcatgagtgcacttctgatcctagctcttgttggagctgctgttgctttccccgtggatgatgatgacaaga 3′gtactcacgtgaagactaggatcgagaacaacctcgacgacaacgattggggcacctacgactactgttct tcgttggag 3′agcaacctcctag 5′其5’端带有EcoR I,3’端带有BamH Ⅰ酶切位点。 1.2 中间载体pPreEGFP的构建:我们将Pre-pro基因定位克隆到pEGFP-N1载体的EcoR I,BamH Ⅰ位点,增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的5’端与Pre-pro基因相连接,这一载体我们称之为:pPreEGFP 1.3 载体pPEL-PreEGFP的构建:将在胰腺中特异性表达的弹性酶Ⅰ启动子(Rat Elastase Ⅰ Promoter,PEL)克隆到pPreEGFP载体的HindⅢ及EcoR Ⅰ位点,PEL的3’端与Pre-pro基因的5’端相连,这一载体我们称之为pPELPreEGFP。 1.4 目的基因PEL-Pre-EGFP的获得:BindⅢ和Sph Ⅰ双酶切pPEL-PreEGFP质
[Abstract]:The purpose of the study of pancreatic exocrine function is to observe the normal secretion process of pancreas from a physiological point of view or to explore the pathogenesis of pancreatic diseases from the perspective of pathophysiology. In this experiment, a transgenic animal model of pancreatic exocrine function was established by microinjection technique, and the secretion process of trypsinogen 鈪，

本文编号：1910611