溃疡性结肠炎动物模型的建立及肠宁方的防治作用初探

发布时间：2018-05-24 06:27

  本文选题：溃疡性结肠炎/中医药治疗/ + 超氧化物歧化酶(SOD)　； 参考：《湖北中医学院》2007年硕士论文

【摘要】： 目的： 建立大鼠溃疡性结肠炎模型，研究中药复方肠宁汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中MDA、SOD及血清中SIgA和IgG表达的影响，并探讨中药对防治溃疡性结肠炎可能的作用机制，为肠宁汤的临床应用和进一步开发提供动物实验数据。 方法： 健康SD大鼠若干只，随机分为4组：A组(中药治疗组)、B组(西药治疗组)、C组(生理盐水组)、D组(空白对照组)。其中A、B、C组采用复合法造成溃疡性结肠炎大鼠模型，造模完成后每日给与常规饮食，不与任何干预，观察2周。空白对照组造模前后均予常规饮食，不给任何干预。造模成功后，A组按体重给予肠宁汤水煎剂灌胃；B组灌服SASP溶液，C组给予生理盐水灌胃；以上灌胃均每日一次，共治疗4周。D组不给任何干预。 标本采集分两次进行：第一次：造模完成后，治疗开始前一天，大鼠禁食不禁水24小时后，随机抽取A、B、C组大鼠各10只，D组6只，摘眼球取血6ml，置于预先标记好的试管中做SIgA、IgG检测，采血后脱颈椎处死，立即打开腹腔，截取距肛门以上6～8cm病变处结肠，沿纵轴中线一分为二，投入到事先准备好的装有4％多聚甲醛固定液的小瓶中，4℃保存。其中一份常规石蜡包埋，切片，HE染色，光镜观察；另一分留做组织匀浆，测SOD及MDA。第二次采集标本：治疗满4周，实验结束前一天记录大鼠体重，大鼠禁食不禁水24小时后，所有大鼠均摘眼球取血，取血后处死，剖腹取结肠。方法及处理同第一次标本采集。 结果： 1肠宁汤对溃疡性结肠炎大鼠一般状况的影响 治疗2周后，A组进食量开始增加，大便性状好转，未再见粘液脓血便，但部分大鼠仍可见稀便；B组进食量无明显增加，粘液脓血便减少，部分大鼠仍有稀糊状大便。治疗4周后，A组大鼠未再出现稀便，活动正常，皮毛恢复光泽，体重明显增加；B组大便性状明显好转，活动正常，皮毛光泽，体重增加。C组治疗2周后大便性状、进食量等无明显改善，体重进一步下降；至4周后，，仍见部分大鼠大便呈稀糊状，并有精神倦怠、反应迟钝、皮毛疏松无光泽等表现。D组大鼠一般状况良好，体重明显增加。 2肠宁汤对UC大鼠结肠粘膜损伤指数(CMDI分)的影响 治疗前A、B、C三组大鼠CMDI(分)较D组显著升高(P＜0.01)；治疗后，A、B两组CMDI(分)显著降低，与D组比较无明显差异(P＞0.05)；与C组比较有显著差异(P＜0.05) 3病理结构观察 治疗前，结肠标本HE染色显示：A、B、C三组粘膜及粘膜下层高度充血、水肿，有糜烂和溃疡形成，局部见坏死。大量炎性细胞、嗜酸性细胞浸润，腺体中杯状细胞显著减少。治疗后A、B两组粘膜充血水肿消失，糜烂和溃疡基本愈合，残存溃疡有明显修复性改变，如粘膜上皮修复，肉芽组织增生等。炎性细胞浸润亦有所缓解。C组无明显变化。 4肠宁汤对UC大鼠结肠组织中MDA、SOD表达的影响 各组大鼠中，A组和B组大鼠结肠组织中MDA含量均显著降低，与C组比较有极显著差异(P＜0.01)；中药组同时能明显提高结肠组织中SOD含量，与西药组、生理盐水组比较均有显著差异(P＜0.05)。 5肠宁汤对UC大鼠血清IgG、SIgA的影响 造模后，A、B、C三组大鼠血清中IgG、SIgA较D组显著上升(P＜0.05)；用药治疗后，A组和B组的SIgG、SIgA含量较C组显著减少(P＜0.01)，A组与B组比较，血清中SIgA、IgG含量无显著性差异(P＞0.05)。 结论： 采用2，4-二硝基氯苯+乙酸联合建模法，既克服了DNCB病程短、自愈性强的缺点，也克服了乙酸法不具有免疫反应模型特征的缺点，又同时保留了二者症状、组织学改变与人类UC相似的优点，是一种较理想的UC模型。通过实验发现：肠宁汤方能明显降低结肠组织的丙二醛(MDA)含量，提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性；显著降低血清中及SIgA、IgG含量，可明显改善肠粘膜的超微结构，有效修复UC大鼠损伤的结肠黏膜。初步证明了氧自由基诱发的脂质过氧化反应、免疫异常在UC发病机理中起重要作用，揭示肠宁汤治疗UC的部分机理可能是通过消除组织中的氧自由基，抑制组织中脂质过氧化反应，提高组织中SOD的活性、改善免疫异常反应而起作用。 进一步深入研究肠宁汤方防治UC的作用机制，尽快开发出方便有效的成药是我们今后工作的重点。
[Abstract]:Objective:
To establish the model of ulcerative colitis in rats, the effect of Chinese medicine compound Changning Decoction on the expression of SIgA and IgG in MDA, SOD and serum in colonic tissue of ulcerative colitis rats was studied, and the possible mechanism of traditional Chinese medicine on the prevention and treatment of ulcerative colitis was discussed, and the experimental data of the clinical application and further development of Changning Decoction were provided.
Method锛

本文编号：1928032