小鼠睾丸支持细胞Attractin基因的抗氧化和抗凋亡作用的初步研究

发布时间：2018-06-09 02:47

  本文选题：Attractin + 凋亡　； 参考：《中华男科学杂志》2014年09期

【摘要】：目的:观察Attractin(Atrn)基因不同程度缺失对小鼠睾丸支持细胞抗氧化和抗凋亡的作用,及其对细胞超氧化物歧化酶(SOD)、caspase 6表达的影响。方法:观察Atrn基因正常表达、部分缺失、完全缺失的三组细胞(psiRNA-TM4、psiAtrn-TM4、mu-SC)的细胞凋亡指数;采用荧光定量PCR、Western印迹技术检测SOD、caspase 6mRNA及蛋白表达水平;采用化学比色法检测细胞中SOD活性和丙二醛(MDA)含量。结果:与对照组psiRNATM4比较,抑制Atrn基因的表达后,支持细胞的SOD mRNA表达水平下降,psiAtrn-TM4、mu-Sc组细胞SOD mRNA表达量分别下降了70.76%和92.58%,caspase 6 mRNA表达水平上升,分别为对照组的5.28倍和2.97倍;蛋白水平的变化趋势与mRNA结果一致,psiAtrn-TM4及mu-Sc组细胞中SOD蛋白的表达分别下降了65.11%和71.0%,caspase 6蛋白表达分别为对照组的3.4倍和2.5倍,差异均有统计学意义(P0.05)。抑制Atrn基因表达后,psiAtrn-TM4、mu-SC组细胞凋亡率分别增加16.22%和22.03%,SOD活性分别下降23.00%和39.37%,mu-SC组MDA含量增加155.22%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:Atrn基因对睾丸支持细胞功能的影响是通过多途径实现的,抗氧化应激以及调控凋亡途径可能在其中起着重要作用。
[Abstract]:Aim: to observe the effects of Attractinus Atrn gene deletion on antioxidation and anti-apoptosis of mouse testicular Sertoli cells and its effect on the expression of superoxide dismutase (SOD) and caspase 6 in mouse testicular Sertoli cells. Methods: the apoptotic index of psiRNA-TM4psiAtrn-TM4mmu-SCC cells with normal expression, partial deletion and complete deletion were observed, and the expression levels of Atrn caspase 6 mRNA and protein were detected by fluorescence quantitative PCR Western blot. Superoxide dismutase (SOD) activity and malondialdehyde (MDA) content were measured by chemical colorimetry. Results: compared with the control group, the expression of Atrn mRNA in Sertoli cells decreased by 70.76% and 92.58%, respectively, which were 5.28 times and 2.97 times higher than those in the control group. The expression of SOD protein in psiAtrn-TM4 and mu-Sc cells decreased by 65.11% and 71.0%, respectively, and the expression of caspase 6 was 3.4 times and 2.5 times of that of the control group, respectively, and the difference was statistically significant (P 0.05). After inhibiting the expression of Atrn gene, the apoptotic rate of psiAtrn-TM4mmu-SC group increased by 16.22% and 22.03%, respectively, and the activity of Atrn decreased by 23.00% and 39.37%, respectively, and the content of Atrn increased by 155.22% in the control group. The difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion the effect of the 1: Atrn gene on the function of testicular Sertoli cells is achieved through multiple pathways, and antioxidant stress and apoptosis regulation may play an important role in it.
【作者单位】： 武汉大学人民医院生殖医学中心;解放军95171部队计划生育办公室;华中科技大学同济医学院计划生育研究所;
【基金】：国家自然科学基金(30570679;81401225)~~
【分类号】：R3416

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本文编号：1998488