重组人肝再生增强因子的克

发布时间：2018-06-12 15:15

  本文选题：肝细胞生长因子 + 基因表达　； 参考：《中华传染病杂志》2005年03期

【摘要】：目的通过构建原核表达系统,在大肠埃希菌中表达重组人肝再生增强因子(hALR)蛋白,为各种急慢性肝损伤及肝衰竭的治疗提供新的治疗方法奠定基础。方法利用正常人肝组织提取总RNA,经一步法逆转录聚合酶链反应(RTPCR)获取hALRcDNA全序列,构建原核表达载体hALRpET28a(+)转化大肠埃希菌(BL21),诱导表达重组hALR蛋白,以组氨酸为标签进行蛋白纯化。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和WesternBlot鉴定重组蛋白。结果经双酶切和DNA测序证实hALRcDNA正确插入表达载体pET28a(+),成功表达并纯化得相对分子质量为23000的重组蛋白,低温诱导表达使
[Abstract]:Objective to construct a prokaryotic expression system and express recombinant human liver regeneration enhancer hALR protein in Escherichia coli to provide a basis for the treatment of acute and chronic liver injury and liver failure. Methods Total RNAs were extracted from normal human liver tissue and hALR cDNA sequence was obtained by one step reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). The prokaryotic expression vector hALRpET28a () was transformed into Escherichia coli BL21, and the recombinant hALR protein was induced and expressed. The hALR protein was purified using histidine as label. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDSPAGE) and Western blot were used to identify the recombinant protein. Results by double enzyme digestion and DNA sequencing, hALR cDNA was correctly inserted into the expression vector pET28a( +). The recombinant protein with relative molecular weight of 23000 was successfully expressed and purified.
【作者单位】： 浙江大学医学院附属第一医院 浙江大学医学院附属第一医院 浙江大学医学院附属第一医院 浙江大学医学院附属第一医院 浙江大学医学院附属第一医院
【基金】：国家863计划(2003AA205150) 国家自然科学基金(30170255) 浙江省“新世纪151人才工程”基金 浙江省卫生厅医学科研人才基金(2001.QN01,2004B064) 浙江省中医管理局青年人才基金(No:2002C037) 浙江省自然科学基金(Y204156)
【分类号】：TQ464

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2010112