靶向CD4分子的小分子免疫抑制剂的筛选及活性鉴定

发布时间：2018-06-13 14:41

  本文选题：CD4靶向小分子化合物 + 免疫抑制　； 参考：《中国人民解放军军事医学科学院》2007年硕士论文

【摘要】： 同种异体器官(骨髓、肾、肝、胰腺等)移植已成为治疗恶性肿瘤或器官衰竭的有效治疗手段之一，但移植后的并发症如移植物抗宿主病(graft versus host disease，GVHD)仍是影响移植成功率的主要因素之一。研究证明T淋巴细胞及它所介导的免疫应答效应与GVHD的发生和发展有着密切的关系；通过对免疫系统包括T细胞功能的抑制可有效预防或治疗GVHD已得到证实。近年来的研究表明CD4~+T细胞是启动移植物排斥反应中最重要的细胞亚群，CD4~+T细胞表面CD4分子与MHC-Ⅱ类分子之间的相互作用是CD4~+T细胞激活并介导免疫应答反应的关键。研制靶向CD4分子的小分子药物，特异性阻断由MHC-Ⅱ类分子与CD4~+T细胞相互作用所介导的移植排斥反应是目前免疫学和药学所关注的焦点。 基于CD4分子与MHC-Ⅱ类分子之间相互作用的立体构型的理论分析，李松教授研究组应用计算机虚拟筛选以及分子对接技术从非肽类有机化合物库中筛选获得了一组靶向CD4分子D1功能表位的小分子化合物，为本研究课题提供了可用于免疫抑制研究靶向CD4的小分子化合物。本课题拟通过体外生物学试验从19种化合物中筛选具有免疫抑制作用的小分子化合物，并建立同种异基因骨髓移植动物模型，体内进一步评价靶向CD4分子的小分子化合物对GVHD的预防作用。 本课题首先应用表达CD4分子的HPB-ALL细胞(T淋巴白血病细胞系，CD4~+阳性率≥90％)和表达MHC-Ⅱ类分子的Daudi细胞(B淋巴白血病细胞系，MHC-Ⅱ类分子阳性率≥90％)、健康人外周血单个核细胞的混合淋巴细胞培养(MLR)方法，对虚拟筛选获得的19个小分子化合物进行检测，MTT法结果证实19个化合物中的5个(JK、E4、J4、A5和J2)化合物具有剂量依赖性的免疫抑制作用，外周血MLR ~3H-TdR掺入法的结果进一步验证了JK、E4、J4、A5和J2的良好免疫抑制作用。 为了进一步验证具有较好免疫抑制作用的J2化合物对GVHD的预防和治疗效应，本课题以近交系C57BL／6(H-2~b)小鼠作为供者，BALB／c(H-2~d)小鼠作为受者，给予受者鼠8Gy~(60)Co全身照射，4-6小时后进行骨髓细胞与脾细胞移植。通过对受体鼠H-2~b基因的检测、生存周期和器官组织的病理学分析，结果初步证实本课题所建立的异基因骨髓移植动物模型具有急性移植物抗宿主病(aGVHD)的基本特征，，可用于对以上小分子化合物预防或治疗aGVHD的评价。在此动物模型上观察了化合物J2口服给药后对移植后aGVHD的预防和治疗作用，结果表明化合物J2能够有效延长GVHD小鼠的生存时间，并能减轻aGVHD所至的组织病理损伤程度。提示小分子化合物J2具有良好的免疫抑制作用。以上结果初步证实了基于CD4分子与MHC-Ⅱ类分子之间相互作用的立体构型为依据筛选获得的CD4靶向小分子J2化合物，具有较好免疫抑制作用，并对异基因骨髓移植所致的aGVHD有预防和治疗作用。
[Abstract]:Allogeneic organ transplantation (bone marrow, kidney, liver, pancreas, etc.) has become one of the effective treatment methods for malignant tumor or organ failure. However, the postoperative complications such as graft versus host disease (GV HDD) are still one of the main factors affecting the success rate of transplantation. It has been proved that T lymphocyte and its mediated immune response are closely related to the occurrence and development of GVHD, and it has been proved that the inhibition of immune system, including T cell function, can effectively prevent or treat GVHD. Recent studies have shown that CD4T cells are the most important cell subsets in the initiation of graft rejection. The interaction between CD4 molecules and MHC- 鈪

本文编号：2014363